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BL琼脂培养基/用于双歧杆菌的分离培养

HB0395

BL Agar Medium

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250g

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见证书

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BL琼脂培养基介绍：

用途：用于双歧杆菌的分离培养。

成分(g/L)

肝浸粉	4.0
蛋白胨	5.0
牛肉浸粉	3.0
酵母浸粉	2.0
胰酪蛋白胨	5.0
可溶性淀粉	0.5
L-半胱氨酸	0.5
葡萄糖	10.0
磷酸二氢钾	1.0
磷酸氢二钾	1.0
大豆胨	3.0
硫酸镁	0.2
硫酸亚铁	0.01
氯化钠	0.01
琼脂	20.0
硫酸锰	0.0067
吐温80	1.0
pH值7.2±0.1	25℃

检验原理：

蛋白胨、肝浸粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、胰酪蛋白胨和大豆胨提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾做缓冲剂；氯化钠维持均衡的渗透压；硫酸锰、硫酸镁、硫酸亚铁可提供双歧杆菌生长的微量元素；L-半胱氨酸为还原剂，辅助培养基维持厌氧环境，有利于厌氧菌的生长；吐温80可促进双歧杆菌的生长并能中和一些有毒成分；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品56.23g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中有少量淀粉、硫酸锰、硫酸亚铁、硫酸镁，灭菌后可能出现少量沉淀。

BL琼脂培养基上婴儿双歧杆菌的生长特征：

BL琼脂培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养48-72小时。

BL琼脂培养基相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
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HBJ9272	含225ml 稀释液的均质袋（4789.35-2023）Diluent	10个/盒	用于乳酸菌检验中样品的稀释液
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HB0390	M17琼脂M17 Agar	250g	用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养
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2100500	氯化血红素Hemin Chloride	1g	每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂或改良GAM琼脂中
2100501	维生素K1vitamin K1	1g	每支添加PYG液体培养基或TTC琼脂基础或CDC厌氧菌琼脂中
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HB0385-1	乳酸杆菌选择性培养基Lactobacillus Selective Agar	250g	用于乳酸杆菌的分离培养
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HB0384-11a	半胱氨酸盐酸盐溶液（冻干粉）	0.1g*10支	添加在HB0384-11中做添加剂使用
HB0384-6a	莫匹罗星锂盐（5mg/支）Lin-Mupirocin	5mg*5支	每支添加于100ml莫匹罗星锂盐改良MRS培养基中
HB8849	S1培养基S1 Medium	250g	用于乳酸链球菌素效价测定
HB9150	选择性改良NPNL培养基Selective NPNL Medium,Modified	250g	用于双歧杆菌选择性分离培养
HB9152	BC琼脂BC Agar	250g	用于药物制剂中乳酸菌的培养和计数
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HB9155	Mitsuoka’s缓冲液Mitsuoka’S Buffer	250g	适用于含有严格厌氧的双歧杆菌活菌产品的稀释
HB0384-6	莫匹罗星锂盐改良MRS培养基 Li-Mupirocin MRS Medium，Modified	250g	用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数
HB0384-71	酸化MRS培养基Acidified MRS Medium	250g	用于酸奶中德氏乳杆保加利亚亚种计数
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HB9176	综合剂培养基Comprehensive Reagent Medium	250g
HB0398-1	PYG液体培养基(不含葡萄糖)PYG Broth Base without Glucose	250g	用于双歧杆菌的增菌培养
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HB8636-2	乳酸杆菌琼脂培养基（GB5009.285-2022维生素B12的测定）Lactobacillus Agar Medium	250g	用于莱士曼乳酸杆菌活化培养（GB5413.14-2010）

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一、适用范围

BL琼脂培养基主要用于食品、药品及微生物检测中双歧杆菌的分离培养，依据国家标准GB 4789.34-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验》[1][3][7]，适用于乳制品、婴幼儿食品等需定量检测双歧杆菌的样品。

二、核心检测方法

采用平板计数法：样品经梯度稀释后接种于BL琼脂培养基，在厌氧条件下（37℃±1℃，48-72小时）培养，通过典型菌落形态（圆形、乳白色、边缘整齐）和革兰氏染色镜检（G⁺多形态杆菌）进行定性及定量分析[1][3]。

三、检出限与定量限

检出限为10 CFU/g（mL），定量限为30-300 CFU/平板。当样品中双歧杆菌浓度低于检出限时需采用增菌培养法[3][7]。

四、质控样品要求

需同步接种以下质控菌株：
• 阳性对照：青春双歧杆菌（ATCC 15707）——应形成典型菌落；
• 阴性对照：大肠埃希氏菌（ATCC 25922）——生长应受抑制[1][7]。

五、关键实验步骤

1. 培养基配制：按说明称量干粉，煮沸溶解后121℃灭菌15分钟，冷却至50℃倾注无菌平板；
2. 样品处理：无菌条件下称取25g样品加入225mL稀释液均质；
3. 接种培养：选择2-3个适宜稀释度，每个稀释度接种2个平板；
4. 结果判读：计数符合形态特征的菌落并计算单位样品含量[3][7]。

六、特别说明

1. 该培养基需避光保存于2-8℃，开封后需密封防潮；
2. 若检测含乳清蛋白的样品，需预先用胰酶处理以消除干扰；
3. 实验环境需符合GB 4789.1-2016《食品微生物学检验总则》的实验室生物安全要求[1][3][7]。

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