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胆汁七叶苷琼脂（BEA）/用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养(GB/T5750.12-2023 生活饮用水标准)

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胆汁七叶苷琼脂（BEA）介绍：

用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养。

成分(g/L)

蛋白胨8.0
胆汁盐20.0
柠檬酸铁0.5
七叶苷1.0
琼脂15.0
pH值7.1 ± 0.225℃

检验原理：蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；胆盐为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂为凝固剂。

用法

称取本品44.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。

胆汁七叶苷琼脂上粪肠球菌的生长特征：

粪肠球菌ATCC29212在胆汁七叶苷琼脂上为棕黑色菌落，366nm紫外灯下菌落周围荧光消失

胆汁七叶苷琼脂微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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    2025-11-21
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    9cm*10/包
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    食品和水中肠球菌检测方法 第2部分：确证试验
    适用范围 本标准规定了食品和水中肠球菌的确证试验方法，适用于食品卫生监测、水质检测及环境样本中肠球菌的鉴定[7]。
    核心检测方法 采用胆汁七叶苷琼脂（BEA）选择性分离培养，结合叠氮化钠抑制革兰氏阴性菌的特性，通过七叶苷水解反应和黑色复合物形成进行特异性鉴定[7]。
    检出限与定量限 检出限为1 CFU/g（或mL），定量限为10 CFU/g（或mL）。需通过梯度稀释法验证样本中目标菌的存活浓度[7]。
    质控样品要求 需同步测试阳性对照菌株（如粪肠球菌ATCC 29212）和阴性对照菌株（如大肠杆菌ATCC 25922），每批次实验需包含空白培养基对照[7]。
    关键实验步骤 1. 样本预处理：液体样本直接接种，固体样本需均质后稀释
    2. 接种培养：划线接种于BEA平板，35℃±1℃培养24-48小时
    3. 结果判读：观察黑色菌落及周围培养基褐变现象[7]
    特别说明 需注意非目标菌（如某些链球菌）可能产生类似反应，需结合革兰氏染色、过氧化氢酶试验等辅助鉴定。培养基中胆汁浓度需严格控制在20%[7]。

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