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假单胞菌琼脂培养基P(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验_
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假单胞菌琼脂培养基P(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验

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假单胞菌琼脂培养基P(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)介绍：

用途：用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验。

成分（g/L）：

Gelatin peptone/明胶蛋白胨 20.0
Anhydrous Magnesium Chloride/无水氯化镁 1.4
Anhydrous Potassium Sulfate/无水硫酸钾 10.0
Agar/琼脂 15.0
pH值7.2 ± 0.2 25℃

用法：

Suspend 46.4g of the medium in one  liter of purified water containing10g of glycerol.  Heat , with  frequent agitation, and boil for 1 minute. Autoclave 15 min  at  121°C.

称取本品  46.4g,加热溶解于1000ml纯化水中，加入甘油10ml, 混匀，分装试管或三角瓶 ,  121℃高压灭菌15 分钟,制成 斜面或倾入无菌平皿。

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USP微生物限度检查标准（USP <61>）解读

适用范围
适用于药品、原料及制剂中需氧菌总数检测及特定致病菌（如铜绿假单胞菌、沙门氏菌等）的筛查。重点关注绿脓菌素检测，确保产品微生物限度符合药典要求[4][8]。
核心检测方法
采用选择性培养基（如假单胞菌琼脂P）结合预试验验证，通过菌落形态、色素特征（如绿脓菌素）及生化反应进行鉴定。需氧条件下培养18-72小时，温度30-35℃[4][6]。
检出限与定量限
- 检出限：≤10 CFU/g（针对目标菌）
- 定量限：需通过预试验确定样品稀释度，确保抑菌成分不影响微生物回收率[4][9]。
质控样品要求
- 阳性对照：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌及沙门氏菌的24小时肉汤培养物（稀释度≥10³）
- 阴性对照：无菌稀释液或培养基[4][8]。
关键实验步骤
1. 样品处理：用pH7.2磷酸盐缓冲液或大豆酪蛋白消化物培养基稀释样品
2. 预试验：验证样品无抑菌性，必要时添加中和剂（如0.5%卵磷脂+4%聚山梨酯80）
3. 接种与培养：划线接种于选择性琼脂，倒置培养18-48小时[4][8][9]。
特别说明
- 培养基制备：需避光保存，灭菌后避免反复加热
- 结果判读：铜绿假单胞菌典型特征为蓝绿色菌落及扩散色素，需结合氧化酶试验确认[6][9]。

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