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Middle Brook 7H10 琼脂/用于分枝杆菌的分离培养

HB6270

Middle Brook 7H10 Agar

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250g

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分枝杆菌
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Middle Brook 7H10 琼脂介绍：

用途：用于分枝杆菌的分离培养。

添加剂：需配套添加13盒HB6271a OADC添加剂，每支添加于90ml Middle Brook 7H10 琼脂中。

成分（g/L）

硫酸铵	0.5
磷酸二氢钾	1.5
磷酸氢二钠	1.5
柠檬酸钠	0.4
硫酸镁	0.025
氯化钙	0.0005
硫酸锌	0.001
硫酸铜	0.001
L-谷氨酸钠	0.5
柠檬酸铁铵	0.04
盐酸吡哆醇	0.001
生物素	0.0005
孔雀石绿	0.00025
琼脂	15.0
pH值6.6±0.2	25℃

用法：

称取本品19g，并吸取甘油5ml，加入900ml蒸馏水中，加热搅拌，煮沸1分钟，121℃高压灭菌10分钟，冷却50-55℃时，加入过滤除菌的OADC添加剂100ml，混匀，倾注平皿或试管，备用。

注：OADC添加剂配制(100ml)：牛白蛋白(V组分) 5g、油酸0.06ml、葡萄糖2g、触酶0.003g、氯化钠0.85g。

注：培养基中含少量硫酸镁、柠檬酸铁铵、硫酸铜、硫酸锌，灭菌后可能出现微量沉淀。

Middle Brook 7H10琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养7-14天。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准：WS 288-2017《肺结核诊断》

标准名称及标准号	WS 288-2017《肺结核诊断》
适用范围	适用于肺结核的实验室诊断，包括分枝杆菌分离培养、鉴定及药物敏感性试验，涵盖Middle Brook 7H10琼脂等培养基的使用。

核心检测方法

采用固体培养基（如7H10琼脂）进行分枝杆菌分离培养，样本经前处理后接种于培养基，在37℃、5%-10% CO₂环境下培养4-8周，观察菌落形态并进行抗酸染色确认。

检出限与定量限

检出限为≥10 CFU/mL（菌落形成单位/毫升），定量限需通过连续稀释法结合菌落计数确定。

质控样品要求

每批次需同时接种阳性对照（如结核分枝杆菌H37Rv标准菌株）和阴性对照（无菌生理盐水），阳性对照应生长良好，阴性对照无污染。

关键实验步骤

1. 样本前处理：采用N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠法消化去污染；
2. 接种与培养：均匀涂布样本于7H10琼脂斜面，密封培养；
3. 结果判读：每周观察菌落形态，记录生长情况。

特别说明

1. 实验需在生物安全三级（BSL-3）实验室进行；
2. 7H10琼脂若出现干裂或污染需弃用；
3. 培养超过8周未见生长方可报告阴性。

行业标准：《实验动物结核分枝杆菌检测方法》

关联性说明

该标准提及Middle Brook培养基用于实验动物结核分枝杆菌检测，但核心内容与WS 288-2017重叠，优先执行WS 288-2017。

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