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孟加拉红琼脂/用于食品中霉菌及酵母菌总数的测定

HB0237-2

Rose Bengal Medium

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250g

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孟加拉红琼脂介绍：

用途：用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定。

成分(g/L)

蛋白胨	5.0
葡萄糖	10.0
磷酸二氢钾	1.0
硫酸镁（无水）	0.5
琼脂	20.0
孟加拉红	0.033
氯霉素	0.1

检验原理：蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需氮源等；葡萄糖作为能源；磷酸二氢钾作为缓冲剂；硫酸镁促进菌体细胞的生长；孟加拉红可抑制细菌的生长，也可限制繁殖快的霉菌菌落的大小和高度，此外还作为着色剂，霉菌或酵母菌吸收后便于菌落的观察；氯霉素为抗生素可抑制细菌的生长；琼脂作为凝固剂。

用法：

称取本品36.6g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。

孟加拉红培养基上细菌的生长特征：

孟加拉红培养基上细菌的生长特征

孟加拉红琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置28±1℃需氧培养120小时。

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国家标准匹配结果

标准名称及标准号

GB 4789.15-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母菌计数》

适用范围

适用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定，包括加工食品、原料、半成品及环境样品。不适用于发酵制品中活性酵母的计数。

核心检测方法

1. 倾注法：样品稀释液与孟加拉红琼脂混合后倾注培养。
2. 涂布法：样品液涂布于凝固的琼脂表面。
培养条件：28℃±1℃，5天，需氧环境。

检出限与定量限

检出限：10 CFU/g（或CFU/mL）
定量限：10-300 CFU/平板（超出范围需调整稀释度）。

质控样品要求

1. 阳性对照：使用标准菌株（如黑曲霉、白色念珠菌）。
2. 阴性对照：无菌生理盐水替代样品。
3. 平行样：每个稀释度至少2个平行。

关键实验步骤

1. 样品均质与梯度稀释（稀释液为无菌生理盐水）。
2. 选择适宜稀释度接种琼脂。
3. 培养后计数典型菌落（霉菌呈绒毛状、酵母菌呈光滑凸起）。
4. 结果计算：以30-150 CFU的平板为有效数据。

特别说明

1. 孟加拉红琼脂需避光保存，防止光降解。
2. 霉菌与酵母菌需区分计数，酵母菌菌落通常较小且颜色单一。
3. 高盐或高糖样品需增加稀释液体积以降低渗透压干扰。

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