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伊红美蓝琼脂（EMB）/弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌(GB、SN标准)

HB0107

Eosin-Methylene Blue Agar

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250g

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见证书

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伊红美蓝琼脂（EMB）介绍：

用途：弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌。

成分（g/L）

蛋白胨	10.0
乳糖	10.0
磷酸氢二钾	2.0
琼脂	15.0
伊红	0.4
美蓝	0.065
PH值7.1±0.2	25℃
※请放置阴凉干燥处保存

检验原理：

蛋白胨作为基础营养物质提供细菌生长所需的氮源以及其他营养元素；乳糖作为可发酵的碳源；伊红和美蓝同时作为抑制剂和指示剂，在酸性条件下产生沉淀，形成具黑色中心有金属光泽或无光泽的菌落。伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，细菌分解乳糖产酸时，细菌带正电荷，可以与带负电的酸性染料结合即染上了伊红的颜色；如果细菌因产碱性物质较多，带负电荷时与带正电荷的碱性染料美蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时，染料可析出结晶形成金属光泽。磷酸氢二钾维持缓冲体系；琼脂作为凝固剂。

用法：

称取本品37.4g，加热溶解1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。

质量控制和典型特征：

在36±1℃培养24±2h,典型大肠杆菌菌落特征为具黑色中心有金属光泽或无光泽。

不同细菌在伊红美蓝琼脂上的生长特征：

伊红美蓝琼脂(EMB)微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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相关标准解读（按相关度排序）

标准名称及标准号	GB 4789.38-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数》
适用范围	适用于食品中大肠埃希氏菌的定性与定量检测，包含伊红美蓝琼脂（EMB）作为选择性分离培养基的使用规范。
核心检测方法	倾注平板法结合EMB培养基进行菌落分离，通过典型菌落形态（金属光泽、紫黑色）初筛，辅以生化试验（如IMViC试验）确认。
检出限与定量限	定量检测限为1 CFU/g（或mL），定性检测限为0.01 CFU/g（或mL）。
质控样品要求	需同步进行阳性对照（如大肠埃希氏菌ATCC 25922）和阴性对照（如肠球菌ATCC 29212），验证培养基选择性与实验环境可靠性。
关键实验步骤	1. 样品稀释后选择适宜梯度倾注EMB琼脂； 2. 36℃±1℃培养18-24小时； 3. 观察并计数典型菌落； 4. 挑取可疑菌落进行革兰氏染色和生化确认。
特别说明	EMB培养基需验证其抑制杂菌能力，若出现非典型菌落（如粉色或无色），需排除干扰并重新实验。

标准名称及标准号	SN/T 0168-2011《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》
适用范围	适用于进出口食品中大肠杆菌的分离鉴定，明确EMB培养基在初筛阶段的标准化操作。
核心检测方法	采用膜过滤法或直接涂布法结合EMB培养基进行分离，结合乳糖发酵试验和β-葡萄糖醛酸酶活性检测进行确认。
检出限与定量限	膜过滤法检测限为1 CFU/100mL（液体样品），涂布法检测限为10 CFU/g（固体样品）。
质控样品要求	每批次实验需包含空白对照（无菌水）和加标样品（添加已知浓度大肠杆菌），偏差需≤0.5 log值。
关键实验步骤	1. 样品均质后过滤或涂布于EMB平板； 2. 37℃培养24小时后判读； 3. 典型菌落转接至EC肉汤进行产气试验； 4. 阳性结果需通过PCR或酶底物法进一步验证。
特别说明	需注意变形杆菌等吲哚阳性菌的干扰，必要时增加尿素酶试验或氧化酶试验进行排除。

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