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T7

YSBC11417-99 {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 150g {{goodObj.date}} 钢研纳克 {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}
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    YSBC11417a-99 | 见证书

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T7介绍:

产品组成:
编号CSiMnPSCrNiCu
YSBC11417-990.660.270.660.030.0190.310.240.023

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

GB/T 34792-2017 分子生物学检测中核酸体外扩增技术通则
标准名称及标准号 GB/T 34792-2017《分子生物学检测中核酸体外扩增技术通则》
适用范围 适用于基于T7 RNA聚合酶的体外转录扩增技术(如NASBA),涵盖食品、环境及临床样本的病原体核酸定性检测
核心检测方法 T7启动子介导的等温扩增:利用T7 RNA聚合酶在恒温条件下高效合成RNA,结合逆转录酶实现靶标核酸指数级扩增
检出限与定量限 1. DNA模板检出限:10 copies/μL
2. RNA模板检出限:50 copies/μL
3. 定量线性范围:10²~10⁷ copies/μL(R²≥0.99)
质控样品要求 1. 阳性对照:含T7启动子的标准质粒(浓度≥50 copies/μL)
2. 阴性对照:无核酸酶水替代模板
3. 内标:扩增效率监控参照物(需与靶标同步扩增)
关键实验步骤 1. 模板制备:煮沸法或试剂盒法提取核酸
2. 反应体系配制:T7 RNA聚合酶(≥5 U/μL)、dNTPs(各1.0mM)、引物(0.3μM)
3. 扩增程序:41℃逆转录15min → 41℃恒温扩增90min
4. 产物检测:电泳法或实时荧光法
特别说明 1. T7酶活性受焦磷酸盐抑制,需添加焦磷酸酶
2. 避免RNase污染,操作区需独立分区
3. 引物设计必须包含T7启动子序列(5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3')
DNA测序技术规范
标准名称及标准号 GB/T 37875-2019《DNA测序技术规范》
适用范围 适用于基于T7启动子的Sanger测序技术,规范高通量测序中T7启动子引物的设计与验证
T7相关要求 1. T7启动子序列必须置于引物5'端
2. 退火温度计算需包含T7序列(增加12℃)
3. 酶结合效率验证:≥95%的克隆应产生有效测序信号
病毒检测方法
标准名称及标准号 SN/T 5334.3-2020《口岸冠状病毒检测-转录介导扩增法》
T7应用要求 1. 使用T7 RNA聚合酶进行等温扩增
2. 酶保存条件:-70℃±5℃,避免反复冻融(≤3次)
3. 反应温度偏差:41℃±0.5℃

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