人T淋巴细胞白血病细胞 A3(Jurkat clone A3)
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产品中文名称:人T淋巴细胞白血病细胞
产品英文名称:A3(Jurkat clone A3)
参考用途:/
形态特性:淋巴母细胞样,圆形,边缘整齐,单个细胞,背景干净
培养基:90%RPMI-1640+10%FBS
培养条件:37℃;5%CO2+95%空气;
培养方法:复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心3-5min,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有6-7mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。培养瓶建议竖着培养。
细胞传代:①离心法:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。②半量换液法:可选择半量换液方式;请将上清培养基轻轻吸走一半,将剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。③注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到大于2×106个/mL时,重复传代操作或者冻存。
存储形式:液氮
提供形式:冻存管;T25培养瓶
备注:用Fas抗体处理Jurkat细胞,用有限稀释法获得一个细胞系,此细胞系对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低。 得到的亚克隆对Fas-介导的凋亡十分敏感。 挑选对新霉素具有抗性的野生型A3细胞,并三次用移码突变诱变剂ICR-191进行处理以分离具有抗Fas抗体杀伤的隐性突变体。
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