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抑肽酶_
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抑肽酶

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抑肽酶介绍:

抑肽酶


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国家标准解读:蛋白酶抑制剂检测技术规范()
标准名称及标准号 GB/T 34782-2017《蛋白酶抑制剂检测技术规范》
适用范围 适用于食品、生物制品及医药原料中蛋白酶抑制剂(包括抑肽酶)的活性检测,明确酶活性抑制率计算方法和干扰物质判定要求。
核心检测方法 紫外分光光度法:通过检测底物在特定波长(280 nm)的吸光度变化,计算抑肽酶对胰蛋白酶的抑制率,标准曲线法量化活性单位(U/mg)。
检出限与定量限 最低检出限为0.01 mg/mL(以蛋白浓度计),定量限为0.05 mg/mL,信噪比需≥10:1。
质控样品要求 每批次检测需包含空白对照、阴性对照(不含抑制剂)和阳性对照(已知活性标准品),平行样数量≥3,加标回收率应控制在85%-115%。
关键实验步骤 1. 样品预处理:使用pH 7.4磷酸盐缓冲液溶解,离心去除不溶物
2. 反应体系:胰蛋白酶与底物(BAEE)的摩尔比1:50,37℃恒温反应10分钟
3. 终止反应:加入30%乙酸溶液终止酶促反应
4. 吸光度测定:立即在280 nm波长下测定吸光度值
特别说明 检测过程中需注意含巯基化合物(如半胱氨酸)的干扰,样品保存温度不得高于4℃且需在24小时内完成检测。
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