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MRS培养基

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MRS培养基


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一、适用范围

适用于食品中乳酸菌的分离培养、计数及鉴定,包括乳制品、发酵食品等样品中乳酸菌的检测。

二、核心检测方法

1. 培养法:使用MRS琼脂培养基进行选择性培养,结合厌氧环境(厌氧培养箱、罐或袋)促进乳酸菌生长。
2. 实时荧光PCR法:新增分子生物学检测手段,通过特异性引物探针实现快速鉴定。

三、检出限与定量限

1. 培养法:检出限为1 CFU/g(mL),定量限为10 CFU/g(mL)。
2. PCR法:检出限可低至102 CFU/g(mL),具体取决于样品基质和DNA提取效率。

四、质控样品要求

1. 参比培养基需由通过国家认证认可的检验机构出具检测报告。
2. 每批次培养基需进行无菌性检查和性能验证,确保无杂菌污染且支持目标菌生长。

五、关键实验步骤

1. 样品处理:使用稀释液(含NaCl和胰蛋白胨)替代生理盐水进行梯度稀释。
2. 接种与培养:涂布或倾注接种后,置于36±1℃厌氧环境培养48±2小时。
3. 结果判读:计数典型菌落并结合革兰氏染色、生化试验(如糖发酵)确认。

六、特别说明

1. 培养基保存:脱水培养基应避光、干燥存放;已配制培养基建议2-8℃保存且不超过4周。
2. 操作规范:含不稳定成分(如抗生素)的培养基需即配即用,避免反复加热融化琼脂。

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