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蛋白酶K标准品

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39450-01-6

100mg

伟业计量

≥40units/mg

见证书

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基质	纯品
形态	固态
有效期
存储条件	2-8℃冷藏避光条件保存。使用前应于室温（20±3℃）平衡，并充分摇动以保证均匀。安瓿瓶一经打开，应立即使用，不可再次熔封后作为标准物质使用，使用中严格防止污染。
用途	本标准物质可作为工作标准，用于日常分析和检测；也可用于检测方法评价和仪器校准等实验室质量控制。
包装	本标准物质采用安瓿瓶包装,规格100mg携带或运输时应有防碎裂保护。
参考资料

一、样品制备

本标准物质采用纯度经准确定值的蛋白酶K为原料，经定性分析、结构确证和初步理化性质分析确认满足标准物质纯度要求后进行分装。

二、溯源性及定值方法

本标准物质的浓度标准值采用配制值，并用高效液相色谱法进行量值核验。通过使用满足计量学特性要求的制备、测量方法和计量器具，保证标准物质量值的溯源性。

三、特征量值及扩展不确定度

序号	组分	标准值	扩展不确定度(k=2)	基体
1	蛋白酶K	≥40units/mg	0.2%	纯品

四、均匀性检验及稳定性考察

参照JJF1343 国家计量技术规范（等效ISO指南35），对分装后的样品进行随机抽样，采用高效液相色谱法对该标准物质进行均匀性检验和长期稳定性跟踪考察。结果表明：均匀性符合F检验规则，稳定性考察良好。

五、包装、储存及使用

本标准物质采用安瓿瓶包装,规格100mg携带或运输时应有防碎裂保护。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准1：《蛋白酶K活力测定法》

标准名称及标准号	GB/T 34791-2017《蛋白酶K活力测定法》
适用范围	适用于蛋白酶K在生物制品、诊断试剂及分子生物学实验中的活力测定。
核心检测方法	紫外分光光度法测定酶解酪蛋白产生的可溶性肽含量，以单位时间内吸光度变化计算酶活力。
检出限与定量限	检出限为0.05 U/mg，定量限为0.2 U/mg（基于标准曲线法）。
质控样品要求	需使用标准品进行校准，每批次实验至少设置3个平行样，相对标准偏差（RSD）≤5%。
关键实验步骤	1. 样品预处理（稀释至线性范围）； 2. 底物反应（37℃恒温反应10分钟）； 3. 终止反应后测定275 nm吸光度。
特别说明	实验需在无DNA/RNA酶污染的环境中进行，避免金属离子干扰。

国家标准2：《分子生物学用酶纯度检测通则》

标准名称及标准号	GB/T 33417-2016《分子生物学用酶纯度检测通则》
适用范围	适用于蛋白酶K等分子生物学用酶的纯度检测及杂质控制。
核心检测方法	SDS-PAGE电泳法检测蛋白质纯度，HPLC法测定杂蛋白含量。
检出限与定量限	SDS-PAGE法可检出≥5%的杂蛋白，HPLC定量限为0.1%。
质控样品要求	需设置阳性对照（含已知杂蛋白）和阴性对照（纯化酶），重复检测3次。
关键实验步骤	1. 样品变性处理； 2. 电泳分离（12%分离胶）； 3. 银染或考马斯亮蓝染色分析。
特别说明	电泳需使用高纯度试剂，避免外源性蛋白质污染。

行业标准1：《食品微生物检测中蛋白酶K使用规范》

标准名称及标准号	SN/T 5323-2021《食品微生物检测中蛋白酶K使用规范》
适用范围	用于食品微生物检测（如致病菌DNA提取）中蛋白酶K的活性验证及使用条件。
核心检测方法	通过细菌裂解效率评估酶活性，包括菌体悬液浊度变化及DNA得率测定。
检出限与定量限	裂解效率需≥95%，DNA得率定量限为10 ng/μL。
质控样品要求	需使用标准菌株（如大肠杆菌ATCC 25922）进行酶活性验证。
关键实验步骤	1. 酶工作液配制（终浓度0.1-1 mg/mL）； 2. 37℃裂解反应30分钟； 3. 离心取上清测DNA浓度。
特别说明	酶反应体系中需含1% SDS以提高裂解效率。

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