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戊烷脒多粘菌素B琼脂基础/用于炭疽杆菌的培养及初步鉴定_
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戊烷脒多粘菌素B琼脂基础/用于炭疽杆菌的培养及初步鉴定

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戊烷脒多粘菌素B琼脂基础介绍:

用途:用于炭疽杆菌的培养及初步鉴定。

成分(g/L)

蛋白胨20.0
牛肉浸粉3.0
氯化钠5.0
琼脂15.0
pH值7.3-7.525℃

用法:

称取本品4.3g,加热溶解于100ml蒸馏水中,121℃高压灭菌20分钟,冷至50-55℃时,加入无菌戊烷脒0.0025g,多粘菌素B300IU和脱纤维羊血2ml,充分摇匀,倾入于无菌平皿。

戊烷脒多粘菌素B琼脂基础微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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国家标准解读:《炭疽诊断标准及处理原则》
标准名称及标准号 GB 17015-1997《炭疽诊断标准及处理原则》
适用范围
该标准适用于人和动物炭疽的诊断、实验室检测及疫情处理,包括炭疽杆菌的分离培养、形态学鉴定及初步生物学特性分析。
核心检测方法
1. 使用选择性培养基(如戊烷脒多粘菌素B琼脂)分离炭疽杆菌;
2. 通过菌落形态、革兰氏染色及噬菌体裂解试验进行初步鉴定;
3. 结合生化试验(如动力试验、溶血性检测)进一步确认。
检出限与定量限
1. 检出限:每克样本中≥10 CFU/g;
2. 定量限需通过标准菌株的连续稀释实验确定,通常为≥100 CFU/g。
质控样品要求
1. 阳性对照:使用炭疽杆菌标准菌株(如ATCC 4229);
2. 阴性对照:采用非目标菌(如枯草芽孢杆菌);
3. 每批次实验需包含空白培养基对照。
关键实验步骤
1. 样本预处理:无菌操作下均质化处理;
2. 选择性培养:在戊烷脒多粘菌素B琼脂上35±1℃培养18-24小时;
3. 可疑菌落挑取:选择灰白色、不透明、边缘不规则的菌落进行染色及生化鉴定。
特别说明
1. 炭疽杆菌为高致病性病原体,实验需在生物安全三级(BSL-3)实验室进行;
2. 戊烷脒多粘菌素B琼脂可抑制部分杂菌,但需结合其他鉴定方法排除交叉反应;
3. 实验废弃物需高压灭菌处理(121℃, 30分钟)。

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