人胚肺成纤维细胞
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产品中文名称:人胚肺成纤维细胞
产品英文名称:MRC-5
参考用途:优先下单BNCC353614
形态特性:长梭形,成纤维细胞样,边缘不规则,单层贴壁生长
培养基:90%EMEM+10%FBS
培养条件:37℃;5%CO2+95%空气;
培养方法:复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心5min,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。
细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。;④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。
存储形式:液氮
提供形式:(暂不提供)
备注:‖传代情况│P20‖支原体检测│培养法(-)‖STR│AmelogeninX,Y;CSF1PO11,12;D13S31711,14;D16S5399,11;D18S5115,21;D19S43314,15;D21S1131.2;D2S133820;D3S135815,17;D5S81811,12;D7S82010,11;D8S117913;FGA21,23;TH018;TPOX8;vWA15;‖染色体│46,XY,部分细胞为亚二倍体‖使用权限│A类‖描述│MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42~46个倍增时间。
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