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产品中文名称：葡萄座腔菌
产品英文名称：Botryosphaeria dothidea
参考用途：/
形态特性：小型丝状真菌，在综合 PDA 培养基上菌落明显，灰白色，菌丝密集旺盛，向平板边缘蔓延生长，培养基背面暗黄色。
培养基：马铃薯浸粉：10.0g，葡萄糖：20.0g，KH2PO4：3.0g，MgSO4·7H2O：1.5g，硫胺素：0.008g，琼脂：15.0g，pH：6.0±0.2（25℃）
培养条件：28℃，3-5天，好氧
培养方法：①准备上述平板1-2块；②试管斜面表面消毒后，在安全柜中打开；③用无菌接种锄和接种铲切块（见附页），0.5×0.5cm2小正方形块；④将小正方形块平放至平板中心，琼脂表面上；⑤将平板正置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
存储形式：2-8℃
提供形式：斜面；菌液；平板
备注：‖寄主名称│苹果‖致病对象│植物‖采集地│山东临邑‖描述│贝氏葡萄座腔菌Botryosphaeria berengeriana de Notaris（=Botryosphaeria ribis Grossenb. et Dugg.）子囊壳生于树皮表层下的子座内。子座黑色，炭质，内侧色浅，先埋生，后突破表皮，露出顶端。1个子座中有l个至数个子囊壳。子囊壳黑色，扁球形或洋梨形，具乳突状孔口，大小227～254μm×209～247μm，内有许多子囊和侧丝。子囊长棍棒状，无色，顶端细胞壁较肥厚，具二重膜，大小50～80μm×10～14μm，内含8个子囊孢子。子囊孢子单胞
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2. 分子检测法：通过ITS序列扩增（PCR）和测序比对，确认菌种特异性。
定量限（LOQ）：需结合分离培养法，定量下限为103 CFU/g。
2. 阴性对照：采用无菌水或已知未感染样品；
3. 平行实验：每批次样品需包含至少10%的平行重复。
2. DNA提取：采用CTAB法或商用试剂盒提取真菌DNA；
3. PCR扩增：引物选用ITS1/ITS4，退火温度52℃±1℃；
4. 测序分析：比对NCBI数据库，相似度≥99%判定为阳性。
2. 实验废弃物需高温灭菌处理；
3. 分离菌株需保存于-80℃甘油管或液氮中长期保藏。
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