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苏云金芽孢杆菌_
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苏云金芽孢杆菌

BNCC336646 Bacillus thuringiensis {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 冻干粉;斜面;菌液;平板 {{goodObj.date}} 北纳生物/BNCC {{item.norm}} 见详情 {{inventory}}
苏云金芽孢杆菌介绍:

注意:该价格为冻干粉价格,平板加200元,斜面加100元,菌液加150元
产品中文名称:苏云金芽孢杆菌
产品英文名称:Bacillus thuringiensis
参考用途:/
形态特性:菌落直径为0.5-1mm,圆形,边缘整齐,不透明,正面灰白色,中间凸起,表面光滑,质地黏稠,G+(蓝紫色),杆菌
培养基:蛋白胨:10.0g,牛肉粉:3.0g,氯化钠:5.0g,琼脂:15.0g,pH值:7.3±0.1(25℃)
培养条件:30℃;18-24h;好氧
培养方法:①准备上述平板 1-2 块;②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
存储形式:2-8℃
提供形式:冻干粉;斜面;菌液;平板
备注:2023.10月,原单位GIM1.216=AS1.203保藏为粘质沙雷氏菌-serratia marcescens,BNCC鉴定为 苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis。需重新确定具体是哪一个芽孢杆菌

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标准名称及标准号
GB/T 19567.2-2020 苏云金芽孢杆菌检测方法 第2部分:蛋白基因检测
适用范围
本标准适用于农药、生物制剂及环境样本中苏云金芽孢杆菌的定性检测,重点针对其特异性毒蛋白基因(如Cry1Ab、Cry1Ac等)的分子生物学鉴定。
核心检测方法
1. DNA提取:采用CTAB法或商业试剂盒提取目标菌DNA;
2. PCR扩增:使用特异性引物对目标基因进行扩增(如引物序列Bt1/Bt2);
3. 凝胶电泳:通过琼脂糖凝胶电泳验证扩增产物大小(预期条带约200-300 bp)。
检出限与定量限
检出限(LOD):DNA浓度≥1 ng/μL;
定量限(LOQ):需通过标准曲线验证,建议目标基因拷贝数≥103 copies/μL。
质控样品要求
1. 阳性对照:使用标准菌株(如Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD-1);
2. 阴性对照:非目标菌(如枯草芽孢杆菌);
3. 空白对照:无DNA模板的PCR反应体系。
关键实验步骤
1. 样品预处理:固体样本需均质后离心富集菌体;
2. DNA纯度验证:A260/A280比值应为1.8-2.0;
3. PCR条件:预变性94℃ 5min → 35循环(94℃ 30s → 55℃ 30s → 72℃ 30s)→ 终延伸72℃ 5min。
特别说明
1. 实验需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行;
2. 当样本中存在PCR抑制剂时,需增加DNA纯化步骤;
3. 检测结果需结合菌落形态观察及生化试验进行综合判定。

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