人胚肾细胞
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产品中文名称：人胚肾细胞
产品英文名称：293T/17
参考用途：/
形态特性：上皮细胞样，短梭形，边缘不规则，单层贴壁生长
培养基：293T/17细胞专用培养基：88%DMEM-H+10%FBS+1%谷氨酰胺+1%NEAA
培养条件：37℃；5%CO2+95%空气；
培养方法：复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。
存储形式：液氮
提供形式：冻存管；T25培养瓶
备注：293T/17细胞株是293T (293tsA1609neo)细胞株的衍生株。 293T 是293细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株。 293T细胞进行克隆，检测pBND和pZAP载体，得到一株能生成高滴度感染逆转录病毒的衍生株，293T/17。 细胞持续表达猿病毒40(SV40)大T抗原，而因其高转染能力筛选到17号克隆。 293T/17细胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2载体转染得到ANJOU 65 细胞株。 ANJOU 65细胞再用pCRIPgag-2 和 pGPT2E载体转染得到亲宅性外壳表达细胞株BOSC 23。ANJOU 65细胞用携带gpt抗性基因的pCRIPAMgag载体转染得到Bing 双向性表达包装细胞株。
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