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无乳链球菌

BNCC367978

Streptococcus agalactiae Lehmann and Neumann

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冻干粉；斜面；菌液；平板

北纳生物/BNCC

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无乳链球菌介绍：

注意：该价格为冻干粉价格,平板加200元,斜面加100元,菌液加150元
产品中文名称：无乳链球菌
产品英文名称：Streptococcus agalactiae Lehmann and Neumann
参考用途：传染病研究；呼吸道疾病研究
形态特性：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G＋（蓝紫色），球菌，纯度：纯
培养基：特殊蛋白胨：23.0g，可溶性淀粉：1.0g，氯化钠：5.0g，琼脂：10.0g，脱纤维羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃）
培养条件：37°C；18-24h；5%CO2
培养方法：①准备上述平板2块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入2块平板，200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
存储形式：2-8℃
提供形式：冻干粉；斜面；菌液；平板
备注：B族链球菌GBSIII

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国家标准解读：无乳链球菌检测相关标准

标准名称及标准号

GB 4789.40-2020《食品安全国家标准食品微生物学检验无乳链球菌检验》

适用范围

适用于食品及食品加工环境中无乳链球菌的定性检测，包括乳制品、肉制品、水产制品等样本类型。

核心检测方法

采用选择性培养基分离结合PCR确证法：
1. 样品经缓冲蛋白胨水预增菌后接种哥伦比亚血琼脂平板
2. 可疑菌落通过革兰氏染色、CAMP试验初筛
3. 提取DNA进行特异性基因（cfb基因）PCR扩增确证

检出限与定量限

方法检出限为1 CFU/25g(mL)，定量检测需采用平板计数法，报告单位为CFU/g(mL)

质控样品要求

1. 每批次实验须包含阳性对照（ATCC 13813标准菌株）
2. 阴性对照需使用无菌PBS缓冲液
3. 培养基质量控制需记录每批次的促生长试验结果

关键实验步骤

1. 样品前处理：无菌操作称取25g样品与225mL缓冲蛋白胨水均质
2. 增菌培养：36±1℃培养18-24小时
3. 平板分离：划线接种后35℃需氧培养24-48小时
4. 核酸提取：推荐使用细菌基因组DNA提取试剂盒
5. PCR扩增：cfb基因扩增程序为94℃预变性5min，35个循环（94℃ 30s/55℃ 30s/72℃ 30s）

特别说明

1. 需注意B群链球菌与其他β溶血链球菌的鉴别
2. 实验操作应在生物安全二级实验室进行
3. PCR检测引物序列须符合标准附录规定
4. 阳性结果需保存菌种至少3个月备查

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