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产品中文名称：艰难拟梭菌
产品英文名称：Clostridioides difficile (Prevot) Lawson et al.
参考用途：肠道疾病研究 传染病研究
形态特性：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯
培养基：胰蛋白胨：15.0g，大豆胨：5.0g，氯化钠：5.0g，无菌脱纤维羊血：5%，琼脂：15.0g，pH：7.3±0.2(25℃)
培养条件：37℃；24-48h；厌氧；
培养方法：①将冻存管进行37℃水浴溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（培养厌氧菌需将培养基提前置于厌氧环境中除氧24h）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。
存储形式：-80℃
提供形式：平板
备注：/
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2. PCR检测法：针对毒素基因tcdA和tcdB进行核酸扩增。
3. 细胞毒性试验：通过Vero或Hep-2细胞观察毒素引起的细胞病变效应。
2. PCR法：毒素基因检测灵敏度为102 copies/反应，特异性需通过测序验证。
2. 阴性对照：使用不携带tcdA/tcdB基因的梭菌或其他非目标菌。
3. 质控频率：每批次实验需同步进行阳性和阴性对照。
2. 增菌培养：接种至强化梭菌肉汤（RCB），厌氧条件（85% N2, 10% H2, 5% CO2）37℃培养48小时。
3. 分离培养：划线接种至CCFA平板，厌氧培养48小时，观察典型黄色荧光菌落。
4. 生化鉴定：通过脂酶、卵磷脂酶及谷氨酸脱羧酶试验确认。
2. 结果判读：仅分离到产毒菌株（tcdA+/tcdB+）或检测到毒素活性方可判定为阳性。
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