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产品中文名称：艰难拟梭菌
产品英文名称：Clostridioides difficile (Prevot) Lawson et al.
参考用途：肠道疾病研究 传染病研究
形态特性：菌落直径为1-2mm，形状不规则，边缘不规则，不透明，正面白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯
培养基：胰蛋白胨：15.0g，大豆胨：5.0g，氯化钠：5.0g，无菌脱纤维羊血：5%，琼脂：15.0g，pH：7.3±0.2(25℃)
培养条件：37℃；18-24h；厌氧；
培养方法：①准备上述新鲜平板 1-2 块（提前置于厌氧环境除氧24h）；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水（提前置于厌氧环境除氧24h）打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
存储形式：2-8℃
提供形式：冻干粉；平板
备注：/
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GB 4789.12-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 艰难梭菌检验
本标准适用于食品及动物饲料中艰难梭菌的分离、培养及鉴定，包括产毒菌株的检测。
检测流程包括：选择性培养基培养（如CCFA培养基）、生化鉴定（如革兰染色、芽孢观察）、分子生物学检测（如毒素基因tcdA/tcdB的PCR扩增）。
直接培养法的检出限为10 CFU/g（或mL）；PCR方法的检测灵敏度为1×10³ CFU/g（或mL）。
需同步进行阳性对照（产毒艰难梭菌标准菌株）和阴性对照（非产毒菌株或空白培养基），且阳性对照需显示典型菌落形态及毒素基因扩增结果。
1. 样品预处理：使用乙醇或热处理去除杂菌；
2. 增菌培养：厌氧条件下36±1℃培养48小时；
3. 分离培养：观察典型荧光或黄色菌落；
4. 毒素检测：通过细胞毒性试验或PCR确认产毒能力。
1. 实验需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行；
2. 毒素检测需使用新鲜培养物以提高灵敏度；
3. 注意区分艰难梭菌与其他厌氧芽孢杆菌（如产气荚膜梭菌）。
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