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内标/乙腈中孔雀石绿-D5苦酸盐

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内标/乙腈中孔雀石绿-D5苦酸盐介绍:


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标准名称及标准号
GB/T 19857-2005 《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》
适用范围
本标准适用于水产品(鱼类、虾类、贝类等)中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿、结晶紫及其代谢物隐色结晶紫的残留量检测,包括使用同位素内标法(如孔雀石绿-D5)的定量分析。
核心检测方法
采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。样品经乙腈提取后,通过固相萃取柱净化,同位素内标法定量。孔雀石绿-D5作为内标用于校正前处理损失和基质效应。
检出限与定量限
孔雀石绿的检出限(LOD)为0.5 μg/kg,定量限(LOQ)为1.0 μg/kg;隐色孔雀石绿的LOQ为1.0 μg/kg。内标法定量可提升准确度至±15%偏差范围内。
质控样品要求
每批次样品需包含空白对照、加标回收样品(低、中、高浓度)。加标回收率应满足70%~120%,相对标准偏差(RSD)≤15%。内标响应值偏差需控制在±30%以内。
关键实验步骤
1. 样品均质后称取5.0 g,加入乙腈和柠檬酸缓冲液提取;
2. 离心后取上清液经MCX固相萃取柱净化;
3. 洗脱液氮吹浓缩后复溶,过滤上机;
4. 流动相为乙腈-5 mmol/L乙酸铵溶液,梯度洗脱;
5. 质谱采用多反应监测(MRM)模式,内标法定量。
特别说明
孔雀石绿-D5需在样品提取前加入以校正过程损失。乙腈作为提取溶剂需避光保存,防止降解。实验过程需严格避光操作,避免目标物光解。

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