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埃氏&耐热(粪)&总大肠菌群(低浓度)/脱水片水解于99mL缓冲液中使用_
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埃氏&耐热(粪)&总大肠菌群(低浓度)/脱水片水解于99mL缓冲液中使用

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埃氏&耐热(粪)&总大肠菌群(低浓度)/脱水片水解于99mL缓冲液中使用介绍:

证书:
规格:

配套稀释溶液链接:

 磷酸盐缓冲液

1-200CFU(MPN)/100mL

使用说明 及其他:
 由于微生物的敏感性及水化后只能短时间保存(不超过30分钟),请务必阅读全部的配制说明后再开始操作,请严格按照配制说明操作,以确保微生物可用

1,回温至室温(15-30℃)(该过程需要15分钟),在回温至室温前不要打开样品瓶,湿气可能损害样品片,影响回收率

2,一旦至室温,打开样品瓶,将样品片转入100mL无菌水中(直接倒入或者用无菌镊子)

3,盖上盖子轻轻震荡水解瓶,在室温条件下水解不超过10分钟(水解过程需震荡以加速溶解)。确认样品片水解完全。翻转10次混合均匀,所得即为要分析的溶液

4,以贵实验室常规步骤分析


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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

标准名称及标准号

HJ 1001-2018 水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法

适用范围

适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中总大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌的同步检测。脱水片状培养基适用于该方法。

核心检测方法

酶底物法:利用特定营养底物与显色剂组合,通过细菌酶解反应产生颜色变化。脱水片溶解后形成选择性培养基,总大肠菌群分解ONPG呈黄色,大肠埃希氏菌分解MUG产生荧光。

检出限与定量限

检出限: 1 MPN/100mL(100mL水样未检出时报告<1 MPN/100mL)

定量范围: 1 MPN/100mL~2419.6 MPN/100mL(51孔定量盘)

质控样品要求

1. 阳性对照: 大肠埃希氏菌(ATCC 25922)接种脱水片培养基,需同时显色和荧光

2. 阴性对照: 无菌水替代样品,培养后不得显色或荧光

3. 空白对照: 脱水片溶解于无菌缓冲液,培养后颜色需符合试剂要求

4. 平行样: 每批样品≥10%平行双样测定

关键实验步骤

1. 样品前处理: 震荡混匀水样,存在余氯时需加入硫代硫酸钠中和

2. 脱水片溶解: 将1片脱水培养基水解于99mL无菌磷酸盐缓冲液中(45℃±1℃水浴助溶)

3. 接种培养: 取100mL水样加入溶解后培养基,混匀后倒入51孔定量盘,密封后36℃±1℃培养24h

4. 结果判读: 黄色孔为总大肠菌群阳性,黄色+荧光孔为大肠埃希氏菌阳性

5. MPN计算: 根据阳性孔数量查询标准MPN值表

特别说明

1. 脱水片溶解后需1h内使用完毕,避免成分降解

2. 浑浊样品需过滤后检测,高盐样品(电导率≥2500 μS/cm)需稀释

3. 荧光判读需使用366nm紫外灯,显色不足时可延长培养至28h

4. 粪大肠菌群结果=总大肠菌群阳性孔中同时显荧光孔的数量

以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!