人肾上腺皮质腺癌细胞 NCI-H295R
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人肾上腺皮质腺癌细胞 NCI-H295R
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产品中文名称：人肾上腺皮质腺癌细胞
产品英文名称：NCI-H295R
参考用途：具有产生肾上腺雄激素的能力。
形态特性：上皮细胞样，多角形，不规则形，边缘不规则，单层贴壁生长
培养基：专用培养基
培养条件：培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气；
培养方法：复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。
存储形式：液氮
提供形式：冻存管；T25培养瓶
备注：NCI-H295R 改编自 AF Gazdar 和来自肾上腺皮质癌的同事建立的 NCI-H295 多能肾上腺皮质癌细胞系 (ATCC CRL-10296)。原始细胞适应培养基，将群体倍增时间从 5 天减少到 2 天。当原始细胞悬浮生长时，选择适应细胞以单层生长。该细胞系保留了产生肾上腺雄激素的能力。它对血管紧张素 II 和钾离子有反应。
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