GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定
颁发部门:国家卫生和计划生育委员会
标签:
进出口食品
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食品添加剂
GB 5009.240-2016 | GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定 废止
发布日期:2016-08-31 实施日期:2017-03-01
萘析商城 · 检测方法配套指南
GB 5009.240-2016 食品中伏马毒素的测定 · 配套指南
标准全称:GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定 | 适用:谷物、粮油、饲料等中 FB1/FB2/FB3 的测定(2016 版,现行见 GB 5009.240-2023)
伏马毒素(Fumonisin,主要为 FB1、FB2、FB3)由串珠镰刀菌等产生,污染玉米及制品,与神经毒性、食管癌风险相关,水溶性好、易溶于水-有机相体系。第一法 免疫亲和柱-柱后衍生-高效液相色谱-荧光法(IAC-HPLC-FLD):邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生,FLD 检测;第二法 液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS):以 U-[¹³C₃₄]-FB1 等为内标,阴离子交换(SAX)净化、ESI+ MRM 测定;第三法 IAC-柱前衍生 HPLC-FLD 为补充。免疫亲和柱柱容量须≥5000 ng。
一、实验流程速览
① 样品制备:玉米等谷物粉碎过筛/匀浆,饲料混匀,避光低温保存
② 提取:乙腈-水(1:1)振荡提取,离心取上清
③ 净化:伏马毒素免疫亲和柱(柱容量≥5000 ng)或 SAX 柱上样、淋洗、洗脱
④ 衍生:第一法柱后 OPA 在线衍生 / 第三法柱前衍生(FLD)
⑤ 分析:HPLC-FLD 或 LC-MS/MS(ESI+ MRM)
⑥ 定量:同位素内标法(U-[¹³C₃₄]-FB)外标校正
二、标准品与标准物质
标准曲线用伏马毒素 B1/B2/B3 混标或单组分标物配制;以 U-[¹³C₃₄]-FB1/B2/B3 内标校正 LC-MS/MS 回收率。标物多溶于乙腈/水(1:1),须低温避光保存。
乙腈/水中伏马毒素 B1、B2、B3 混合溶液标准物质
SHAM_53470 | B1/B2/B3 混合 | GB 5009.240-2016 | 1.2 mL
明确标注 GB 5009.240-2016,标准系列配制
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乙腈/水中 [¹³C₃₄]-伏马毒素 B1,B2,B3 混合溶液(内标)
NCS1603804 | B1/B2/B3 各 5 μg/mL | 1.2 mL | ¹³C₃₄ 标记
第二法 LC-MS/MS 同位素内标,校正回收率
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三、净化柱与前处理耗材
伏马毒素样品净化可采用伏马毒素专用免疫亲和柱(柱容量≥5000 ng)或多功能净化柱;LC-MS/MS 第二法可辅以 SAX 阴离子交换柱。
氮吹仪 —— 洗脱液浓缩复溶
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四、食品基质质控样
每批样品建议搭配与样品基质一致的伏马毒素质控/校准混标。下列为多毒素外标混标(含 FB1/FB2),玉米/饲料基质专项质控样萘析暂未上架,建议按 GB 5009.240 自备。
乙腈中 10 种真菌毒素外标混标
NCS1604645 | 含 FB1 5 μg/mL、FB2 5 μg/mL(另含 AF、OTA、ZEN、T-2、HT-2、DON)| 1.2 mL
多毒素校准与质控参考,含 FB1/FB2 组分
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五、试剂
以下为方法所需试剂,萘析商城暂未以单品形式上架,建议实验室按等级自备;HPLC 与 LC-MS/MS 用试剂须为色谱纯。
乙腈、甲醇(色谱纯)—— 提取与复溶(常用乙腈-水 1:1)
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邻苯二甲醛(OPA)—— 第一法/第三法柱后或柱前衍生
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甲酸(色谱纯)—— LC-MS/MS 流动相添加剂
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实验用水(一级水)—— 提取与稀释
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六、仪器与耗材
核心检测设备由实验室自备;HPLC-FLD 须配柱后衍生仪,LC-MS/MS 须校准 ESI+ MRM 通道。
高效液相色谱仪(HPLC)配柱后衍生仪与荧光检测器(FLD)—— 第一法核心
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液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS,配 ESI 源)—— 第二法核心
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C18 分析柱 / SAX 阴离子交换柱 —— 色谱分离
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固相萃取装置、高速离心机、氮吹仪
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分析天平(0.1 mg)、棕色容量瓶(避光)
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备货建议:伏马毒素水溶性好、污染以玉米制品为主,样品须避光、低温保存并尽快测定;LC-MS/MS 第二法优先采用 U-[¹³C₃₄]-FB 内标校正回收率。建议优先备齐 FB 混标(SHAM_53470)与内标(NCS1603804)、伏马毒素免疫亲和柱(380-00920 / NHC0008),并注意免疫亲和柱柱容量须≥5000 ng;每批带空白、加标回收与质控样,回收率控制在 80%~120%、RSD≤15%。
GB 5009.240-2016
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