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GB 5009.240-2016 | GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定 废止

GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定

颁发部门:国家卫生和计划生育委员会

标签: 进出口食品 , 食品添加剂

萘析商城 · 检测方法配套指南

GB 5009.240-2016 食品中伏马毒素的测定 · 配套指南

标准全称:GB 5009.240-2016 食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定 | 适用:谷物、粮油、饲料等中 FB1/FB2/FB3 的测定(2016 版,现行见 GB 5009.240-2023)

伏马毒素(Fumonisin,主要为 FB1、FB2、FB3)由串珠镰刀菌等产生,污染玉米及制品,与神经毒性、食管癌风险相关,水溶性好、易溶于水-有机相体系。第一法 免疫亲和柱-柱后衍生-高效液相色谱-荧光法(IAC-HPLC-FLD):邻苯二甲醛(OPA)柱后衍生,FLD 检测;第二法 液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS):以 U-[¹³C₃₄]-FB1 等为内标,阴离子交换(SAX)净化、ESI+ MRM 测定;第三法 IAC-柱前衍生 HPLC-FLD 为补充。免疫亲和柱柱容量须≥5000 ng。

一、实验流程速览

① 样品制备:玉米等谷物粉碎过筛/匀浆,饲料混匀,避光低温保存 ② 提取:乙腈-水(1:1)振荡提取,离心取上清 ③ 净化:伏马毒素免疫亲和柱(柱容量≥5000 ng)或 SAX 柱上样、淋洗、洗脱 ④ 衍生:第一法柱后 OPA 在线衍生 / 第三法柱前衍生(FLD) ⑤ 分析:HPLC-FLD 或 LC-MS/MS(ESI+ MRM) ⑥ 定量:同位素内标法(U-[¹³C₃₄]-FB)外标校正

二、标准品与标准物质

标准曲线用伏马毒素 B1/B2/B3 混标或单组分标物配制;以 U-[¹³C₃₄]-FB1/B2/B3 内标校正 LC-MS/MS 回收率。标物多溶于乙腈/水(1:1),须低温避光保存。

乙腈/水中伏马毒素 B1、B2、B3 混合溶液标准物质
SHAM_53470 | B1/B2/B3 混合 | GB 5009.240-2016 | 1.2 mL
明确标注 GB 5009.240-2016,标准系列配制
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乙腈/水中 [¹³C₃₄]-伏马毒素 B1,B2,B3 混合溶液(内标)
NCS1603804 | B1/B2/B3 各 5 μg/mL | 1.2 mL | ¹³C₃₄ 标记
第二法 LC-MS/MS 同位素内标,校正回收率
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三、净化柱与前处理耗材

伏马毒素样品净化可采用伏马毒素专用免疫亲和柱(柱容量≥5000 ng)或多功能净化柱;LC-MS/MS 第二法可辅以 SAX 阴离子交换柱。

岛津 SHIMSEN 伏马毒素免疫亲和柱
380-00920 | FB 专用 | 3 mL,20 支/盒
专用于伏马毒素净化
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伏马毒素免疫亲和柱
NHC0008 | FB 专用 | 3 mL,25 支/盒
伏马毒素专用柱备选,适配大批量样品
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伏马毒素多功能净化柱
NB-AY-MPC231 | 多功能专用 | 25 支/盒
一步法快速净化,覆盖粮食谷物饲料
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SAX 强阴离子交换固相萃取柱
500 mg/6 mL | 30 支/盒
阴离子交换,LC-MS/MS 辅助净化
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氮吹仪 —— 洗脱液浓缩复溶
萘析暂未上架

四、食品基质质控样

每批样品建议搭配与样品基质一致的伏马毒素质控/校准混标。下列为多毒素外标混标(含 FB1/FB2),玉米/饲料基质专项质控样萘析暂未上架,建议按 GB 5009.240 自备。

乙腈中 10 种真菌毒素外标混标
NCS1604645 | 含 FB1 5 μg/mL、FB2 5 μg/mL(另含 AF、OTA、ZEN、T-2、HT-2、DON)| 1.2 mL
多毒素校准与质控参考,含 FB1/FB2 组分
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五、试剂

以下为方法所需试剂,萘析商城暂未以单品形式上架,建议实验室按等级自备;HPLC 与 LC-MS/MS 用试剂须为色谱纯。

乙腈、甲醇(色谱纯)—— 提取与复溶(常用乙腈-水 1:1)
萘析暂未上架
邻苯二甲醛(OPA)—— 第一法/第三法柱后或柱前衍生
萘析暂未上架
甲酸(色谱纯)—— LC-MS/MS 流动相添加剂
萘析暂未上架
实验用水(一级水)—— 提取与稀释
萘析暂未上架

六、仪器与耗材

核心检测设备由实验室自备;HPLC-FLD 须配柱后衍生仪,LC-MS/MS 须校准 ESI+ MRM 通道。

高效液相色谱仪(HPLC)配柱后衍生仪与荧光检测器(FLD)—— 第一法核心
萘析暂未上架
液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS,配 ESI 源)—— 第二法核心
萘析暂未上架
C18 分析柱 / SAX 阴离子交换柱 —— 色谱分离
萘析暂未上架
固相萃取装置、高速离心机、氮吹仪
萘析暂未上架
分析天平(0.1 mg)、棕色容量瓶(避光)
萘析暂未上架
备货建议:伏马毒素水溶性好、污染以玉米制品为主,样品须避光、低温保存并尽快测定;LC-MS/MS 第二法优先采用 U-[¹³C₃₄]-FB 内标校正回收率。建议优先备齐 FB 混标(SHAM_53470)与内标(NCS1603804)、伏马毒素免疫亲和柱(380-00920 / NHC0008),并注意免疫亲和柱柱容量须≥5000 ng;每批带空白、加标回收与质控样,回收率控制在 80%~120%、RSD≤15%。