小肠结肠炎耶尔森氏菌 Yersinia enterocolitica CICC 21669
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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。
本标准适用于食品(包括乳制品、肉类、水产品等)中小肠结肠炎耶尔森氏菌的定性检测,规定了分离培养、生化鉴定和血清学确认的全流程方法。
采用两阶段增菌法:25g样品加入225mL改良磷酸盐缓冲液,26℃培养48-72小时;乳制品直接接种选择培养基,其他样品需经碱处理(0.5mL增菌液+4.5mL碱处理液)后接种。分离培养使用CIN-1琼脂和改良Y琼脂平板,26℃培养48小时。
标准未明确具体数值,定性方法检出限与样品前处理、增菌效率相关。常规条件下可检测≥10 CFU/25g的初始污染量。
每批次需同步进行阴性质控(无菌PBS)和阳性质控(标准菌株ATCC 9610)。阳性质控应呈现典型菌落形态(CIN-1平板中心深红色边缘透明),且生化反应符合VP阳性、尿素酶阳性特征。
1. 温度控制:所有培养步骤需严格保持26±1℃
2. 碱处理:非乳制品需用0.5% KOH处理9秒
3. 菌落筛选:挑取CIN-1平板上直径1-2mm的牛眼状菌落
4. 生化验证:需完成改良克氏双糖铁、尿素酶、VP等7项试验
1. 动力试验需在25-28℃条件下观察
2. 血清学确认应使用多价诊断血清,交叉反应需排除假结核耶尔森氏菌
3. 冷冻样品需在2-5℃解冻,检测时限不超过18小时
4. 环境分离株需增加毒力基因检测(如ail、yst)
以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!