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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)

WJ6400-1

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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)

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一、适用范围

依据《中国药典》2020版四部通则，TSB培养基主要应用于：
1. 通则1101无菌检查法：供试品的无菌检验，确保药品及生物制品中无微生物污染；
2. 通则1105微生物计数法：非无菌产品中需氧菌总数的测定；
3. 通则1106控制菌检查法：特定致病菌的筛查及验证[1]。

二、核心检测方法

1. 需氧菌培养：30~35℃培养不超过3天，观察培养基浊度变化；
2. 真菌培养：20~25℃培养5~7天，需延长培养时间以确认生长；
3. 控制菌验证：通过接种已知菌株（如金黄色葡萄球菌）验证培养基促生长能力[1]。

三、检出限与定量限

1. 检出限：药典未规定具体数值，但要求培养基需通过灵敏度试验（如接种≤100CFU菌液应能检出）；
2. 定量限：微生物计数法中采用活菌计数法，需满足回收率≥70%[1]。

四、质控样品要求

1. 质控菌株：金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、铜绿假单胞菌CMCC(B)10104、白色念珠菌CMCC(F)98001等；
2. 菌株传代：不得超过5代，确保生物学特性稳定；
3. 阳性对照：每批次实验需同步进行质控菌生长验证[1]。

五、关键实验步骤

1. 培养基配制：按30g/L比例称取TSB干粉，加热煮沸至完全溶解；
2. 灭菌条件：121℃高压灭菌15分钟，避免过度加热导致碳源焦化；
3. 接种方法：采用薄膜过滤法或直接接种法，确保供试品与培养基充分接触[1]。

六、特别说明

1. pH控制：灭菌后需确认pH为7.3±0.2，超出范围需重新配制；
2. 储存要求：未开封干粉需密封避光保存，已配制液体培养基2~8℃保存不超过72小时；
3. 灵敏度检查：每批新购培养基需进行促生长能力验证[1]。

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