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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)

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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)


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《中国药典》2020版四部 通则1101无菌检查法

适用范围:适用于无菌药品、生物制品及医疗器材的无菌检查,涵盖需氧菌、厌氧菌及真菌的检测[1]。
核心检测方法:采用薄膜过滤法或直接接种法,通过TSB培养基对样品进行增菌培养,观察微生物生长情况[1]。
检出限与定量限:可检出1~100 CFU/mL的微生物,定量限为10 CFU/mL,满足药品无菌检查的灵敏度要求[1]。
质控样品要求:需使用金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)、大肠埃希氏菌(CMCC 44102)等5种标准菌株进行培养基灵敏度验证,菌株传代次数不超过5代[1][9]。
关键实验步骤:包括培养基配制(30g/L)、灭菌条件(121℃/15min)、培养温度(30~35℃)及观察周期(≤3天)[1][4]。
特别说明:若培养基出现浑浊、沉淀或颜色异常需废弃;含糖培养基需额外验证灭菌后葡萄糖的热稳定性[1][4]。

《中国药典》2020版四部 通则1105微生物计数法

适用范围:非无菌药品的需氧菌总数、霉菌及酵母菌计数,适用于口服制剂及外用药品的微生物限度检查[1]。
核心检测方法:采用平皿法或薄膜过滤法,TSB用于样品稀释后的微生物复苏培养,需同步进行方法适用性试验[1]。
检出限与定量限:最低检出限为10 CFU/g,定量限为100 CFU/g,满足微生物计数法的准确性要求[1]。
质控样品要求:需验证白色念珠菌(CMCC 98001)、黑曲霉(CMCC 98003)等6种菌株的回收率(0.5~2.0倍)[1]。
关键实验步骤:样品预处理(pH调节、中和剂添加)、培养条件(细菌30~35℃/≤3天,真菌20~25℃/≤5天)[1]。
特别说明:含抑菌成分的样品需通过离心沉淀或薄膜过滤法消除干扰;TSB的促生长能力需定期验证[1][4]。

《中国药典》2020版四部 通则1106控制菌检查法

适用范围:特定致病菌(如大肠埃希菌、沙门氏菌)的定性检查,适用于非无菌药品的微生物安全性评价[1]。
核心检测方法:采用选择性培养基结合TSB预增菌,通过生化反应或PCR法确认目标菌存在[1]。
检出限与定量限:定性检测限为1 CFU/10g,定量限不适用,重点关注假阴性/阳性风险控制[1]。
质控样品要求:需使用标准菌株(如大肠埃希菌CMCC 44102)进行方法验证,菌悬液浓度控制在10~100 CFU/mL[1][9]。
关键实验步骤:包括增菌培养(TSB 30~35℃/18~24h)、选择性分离(MAC/VRBD琼脂)及确证试验(IMViC等)[1]。
特别说明:需验证TSB对损伤菌的修复能力;若样品含防腐剂需调整稀释比例或增菌时间[1][4]。

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