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MRS琼脂/用于食品中乳酸菌的分离培养或计数

HB0384

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250g

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详见说明

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用途:用于食品中乳酸菌的分离培养或计数。

成分(g/L)：

检验原理：

蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌并中和细胞毒性物质，为乳酸菌提供一个良好的生长环境；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品66.2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟备用。

注：培养基中有少量的硫酸镁和硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀。

MRS上德氏乳杆菌和嗜热链球菌的菌落形态:

乳酸菌保存方法

方法1：菌株可保存于甘油肉汤保存管内，取纯化后的菌落接种于MRS平板培养基内，于35±1℃厌氧培养48-72h，用无菌棉签刮取适量菌落于甘油肉汤管内混匀，于-80℃冰箱保存。

方法2：长期保存可将菌株冷冻干燥后冷藏保存，取纯化后的菌落接种于MRS平板培养基内，于35±1℃厌氧培养48-72h后，向每个平板中加入1mL脱脂奶粉配成的冻存液，用L涂布棒刮取平板上菌落于冻存液内，继而吸取200uL放入冻干瓶内，冻干后于2-4℃冰箱保存。

以上信息仅供参考，请以实物批次为准！

适用范围

本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验，包括乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌等需氧或兼性厌氧菌的分离培养。MRS琼脂培养基作为核心培养基，支持乳酸菌特异性生长[4][9]。

核心检测方法

1. 菌落计数法：采用倾注或涂布法接种MRS琼脂，36±1℃厌氧培养48-72小时
2. 实时荧光PCR法（新增）：通过DNA提取液和特异性引物进行定量检测[9]

检出限与定量限

• 常规培养法：检出限10 CFU/g(mL)，定量范围10²-10⁷ CFU/g(mL)
• PCR法：检测灵敏度达10³ copies/μL（针对目标菌属特异性基因）

质控样品要求

1. 阳性对照：使用标准菌株（如植物乳杆菌ATCC 14917）
2. 培养基性能验证：需满足菌落形态典型、无杂菌污染
3. 每批次培养基应检测pH值（6.2±0.2）和灭菌效果[3][4]

关键实验步骤

1. 培养基制备：64.25g干粉溶于1000ml蒸馏水，121℃灭菌15分钟
2. 样品处理：均质后梯度稀释（需预热稀释液至36±1℃）
3. 培养条件：厌氧环境（罐/袋/箱）下培养，湿度＞90%[4][9]

特别说明

1. 新标准新增PCR方法作为可选检测手段
2. 电子天平精度由0.01g提升至0.001g
3. 明确培养基中硫酸镁/锰可能产生微量沉淀属正常现象[3][9]
4. 特殊处理样品（如包埋菌）需进行前处理验证

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！