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猪副嗜血杆菌培养基/用于副嗜血杆菌疫苗生产

HB8545

Haemophilus Parasuis Medium

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250g

hopebio

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猪副嗜血杆菌培养基介绍：

用途:用于副嗜血杆菌疫苗生产。

用法

称取本品 56.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,116℃高压灭菌 40 分钟,接种前按培养基总量 5 % 加猪血清或牛血清，并同时加入2‰葡萄糖、0.1‰辅酶Ⅰ。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准：副猪嗜血杆菌检测方法

适用范围

适用于猪体内副猪嗜血杆菌的分离培养、生化鉴定及PCR检测，涵盖临床样本（如肺脏、关节液等）的实验室检测流程[6]。

核心检测方法

1. 分离培养：采用TSA培养基（胰蛋白胨大豆琼脂）辅以NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）进行细菌初代培养；
2. 生化鉴定：通过葡萄糖、蔗糖等碳源代谢试验及过氧化氢酶试验进行菌种确认；
3. PCR检测：巢式PCR或实时荧光PCR用于特异性基因片段扩增[6]。

检出限与定量限

1. 分离培养法：最低检出限为10² CFU/mL；
2. 实时荧光PCR：检测灵敏度达10 copies/μL，可对菌液浓度进行定量分析[6]。

质控样品要求

1. 阳性对照：使用已知血清型菌株（如4型、5型、13型）；
2. 阴性对照：采用无菌PBS缓冲液或非目标菌株（如大肠杆菌）；
3. 每批次实验需包含质控样本以确保结果可靠性[6]。

关键实验步骤

1. 样本预处理：组织悬液需经消化液I（含蛋白酶K）处理；
2. DNA提取：酚-氯仿法提取细菌基因组DNA；
3. PCR扩增：采用16S rRNA或ompP2基因特异性引物进行扩增[6]。

特别说明

1. 菌株传代需在TSA培养基中添加5%灭活牛血清以维持NAD依赖性；
2. PCR检测需排除猪链球菌等交叉反应菌株的干扰[6]。

行业标准：DB51/T 2708-2020 副猪嗜血杆菌防治技术规范

适用范围

针对四川省内规模化猪场的副猪嗜血杆菌病防控，涵盖诊断、疫苗免疫及环境管理要求[10]。

核心检测方法

1. 临床诊断：基于多发性浆膜炎与关节炎的典型病变进行初步判断；
2. 实验室确诊：参照GB/T 34750-2017执行[10]。

质控样品要求

1. 血清学检测需使用标准抗原（如15个血清型混合抗原）；
2. 疫苗效力试验需设置攻毒保护率≥80%的合格标准[10]。

特别说明

1. 推荐使用多价灭活疫苗进行免疫，免疫程序需包含母猪产前4周接种；
2. 发病猪群需隔离治疗，环境需用0.5%过氧乙酸每日消毒[10]。

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