10×PCR缓冲液_单标_基质类_标准物质_萘析商城

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10×PCR缓冲液

SHAM_95322

10×PCR buffer

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500mL

伟业计量

符合《SN/T 2976》

见证书

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10×PCR缓冲液介绍：

一、基本信息：

基质	水
形态	液态
有效期	2023-10-13
存储条件	阴凉密闭及避光条件下保存。使用前应恒温至20±4℃，并充分摇动以保证均匀。本标准物质打开后应一次性使用，使用中严格防止沾污。
用途	本标准物质可作为工作标准，用于日常分析和检测；也可用于检测方法评价和仪器校准等实验室质量控制。
别名
理化性质
稀释方法

二、样品制备：

本标准物质采用纯度经准确定值的氯化钾、硫酸铵、硫酸镁、Tris、Triton X-100和BSA为溶质，以盐酸水溶液为溶剂，在室温20±2℃洁净实验室中采用重量-容量法配制而成。

三、溯源性及定值方法：

本标准物质的浓度标准值采用配制值，并用重量分析法进行量值核验。通过使用满足计量学特性要求的制备、测量方法和计量器具，保证标准物质量值的溯源性。

四、特征量值及扩展不确定度：

序号	组分	标准值	扩展不确定度(k=2)	基体
1	PCR缓冲液	符合《SN/T 2976》	/	水

五、均匀性检验及稳定性考察：

参照JJF1343 国家计量技术规范（等效ISO指南35），对分装后的样品进行随机抽样，采用重量分析法对该标准物质进行均匀性检验和长期稳定性跟踪考察。结果表明：均匀性符合F检验规则，稳定性考察良好。

六、包装、储存及使用：

本标准物质采用棕色玻璃瓶包装,规格500mL携带或运输时应有防碎裂保护。

七、研制依据：

八、参考资料：

SN/T 2976-2011 鲑鱼立克次氏体检疫技术规范巢式聚合酶链式反应法

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商城编码	产品名称	标准值	规格	CAS号	有效期	库存	标准价	数量	操作
伟业计量 BWR5043-2016	TBE电泳缓冲溶液（5倍浓缩液）/SN/T 2976-2011	3组分	500mL			0	84

标准名称及标准号

标准名称	进出口食品中致泻大肠埃希氏菌检测方法实时荧光PCR法
标准号	SN/T 2976-2011

适用范围

适用对象	进出口食品中致泻大肠埃希氏菌（包括肠致病性、肠侵袭性、肠产毒性、肠出血性大肠埃希氏菌）的检测
样品类型	食品样品（如肉类、乳制品、水产品等）及环境样本

核心检测方法

方法原理	实时荧光PCR技术，通过特异性引物和探针扩增目标基因片段（如stx1、stx2、eae等），结合荧光信号判定结果
技术流程	样品前处理→增菌培养→DNA提取→PCR扩增→结果分析

检出限与定量限

检出限	10 CFU/g（固体样品）或10 CFU/mL（液体样品）
定量限	需根据标准曲线及实验条件确定，通常为≥20 CFU/g或≥20 CFU/mL

质控样品要求

阳性对照	使用目标菌株（如大肠埃希氏菌标准菌株）作为阳性对照，确保引物和探针有效性
阴性对照	无菌水或非目标菌DNA作为阴性对照，排除交叉污染

关键实验步骤

DNA提取	采用酚-氯仿法或商品化试剂盒提取细菌DNA，确保纯度（A260/A280=1.8-2.0）
PCR体系	反应体系含10×PCR缓冲液、dNTPs、引物、探针、Taq酶及模板DNA，总体积25 μL
扩增程序	预变性（95℃ 5min）→ 40个循环（95℃ 15s，60℃ 30s）→ 荧光信号采集

特别说明

污染控制	实验分区操作（试剂配制区、样品处理区、扩增区），使用紫外灯消毒和去污染试剂
结果判定	Ct值≤35且扩增曲线呈典型"S"形判为阳性；阴性对照和空白对照无扩增时结果有效

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！