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产品中文名称：大丽轮枝菌
产品英文名称：Verticillium dahliae Kleb.
参考用途：/
形态特性：小型丝状真菌，在综合PDA培养基上生长良好，培养基正面白色，丝状，蔓延生长，背面黄色
培养基：马铃薯浸粉：10.0，葡萄糖：20.0，KH2PO4：3.0，MgSO4·7H2O：1.5，硫胺素：0.008，琼脂：15.0，pH：6.0±0.2（25℃）
培养条件：28℃；5-7天；好氧
培养方法：①准备90mm固体平板1个，接种铲、接种锄各一个；②接种铲、接种锄火焰灼烧，冷却备用；③斜面外壁消毒后，在无菌环境下打开，先用接种锄，再用接种铲切块；④接种铲将菌块挑起，放至平板琼脂表面上，盖好平板；⑤将平板正置于霉菌培养箱，按上述条件培养，禁止封口膜密封，平板基本长满即可使用。
存储形式：2-8℃
提供形式：斜面；菌液；平板
备注：‖寄主名称│黄栌‖致病对象│植物‖描述│分生孢子梗基部始终透明，上端由2～4层辐射状轮生的枝梗和一个顶枝组成，无色，具隔膜，每层间相距20～45μm，每轮有3～4根枝梗，枝梗13.5～21.5×2.0～3.0μm，每小枝顶生一至数个分生孢子，全长110.0～130.0×2.5μm。分生孢子长卵圆形，无色，单胞，2.0～9.5×1.5～3.0μm。
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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。
2. 分子检测：基于特异性引物的PCR扩增，靶向β-tubulin基因序列。
3. 致病性验证：通过接种寄主植物验证菌株致病性。
- 分离培养检测限：≤10个活孢子/克（需结合稀释涂布法统计）。
- 阴性对照：添加非目标真菌（如尖孢镰刀菌）及无菌水对照。
- 空白对照：仅含培养基或提取试剂的空白样本。
2. DNA提取：使用CTAB法或商业试剂盒提取基因组DNA。
3. PCR扩增：反应体系含正向/反向引物（5'-TGTTGCTTCGGCGGACT-3'，5'-TCGAACATGTGCTCCCCG-3'），退火温度58℃。
4. 电泳分析：1.5%琼脂糖凝胶电泳检测预期435 bp条带。
- 形态学鉴定需排除近缘种（如黑白轮枝菌），建议结合分子结果综合判定。
- 实验废弃物需121℃高压灭菌30分钟后再处理。
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