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产品中文名称：尖孢镰孢菌
产品英文名称：Fusarium oxysporum
参考用途：病原菌
形态特性：在综合马铃薯培养基上蔓延生长，丝状，边缘不规则，正面白色菌丝，纯度：纯
培养基：马铃薯浸粉：10.0g，葡萄糖：20.0g，KH2PO4：3.0g，MgSO4·7H2O：1.5g，硫胺素：0.008g，琼脂：15.0g，pH：6.0±0.2（25℃）
培养条件：28℃；5-7天；好氧
培养方法：①将冻存管进行水浴（霉菌30℃）溶解，快速振摇溶解；②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL）；④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。
存储形式：-80℃
提供形式：斜面；菌液；平板
备注：原单位保藏为GIM3.144Verticillium albo黄萎轮枝孢，BNCC its测序最高相似度Fusarium oxysporum（99.82%）
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GB/T 36812-2018《植物检疫 尖孢镰刀菌实时荧光PCR检测方法》
本标准适用于植物及其产品中尖孢镰刀菌的快速检测，包括种子、苗木、土壤及植物组织样本。
采用实时荧光PCR技术，通过特异性引物和探针扩增尖孢镰刀菌的ITS基因片段。检测过程包括DNA提取、PCR反应体系配置、扩增程序运行及结果分析。
检出限为10 copies/μL DNA模板，定量限为50 copies/μL，需通过标准曲线验证扩增效率（90%-110%）。
每批次检测需包含阴性对照（无菌水）、阳性对照（已知浓度尖孢镰刀菌DNA）及空白对照（无模板）。阳性对照的Ct值需在18-25范围内。
1. 样本预处理：研磨后使用CTAB法提取DNA；
2. PCR体系：加入引物F/R、探针、Taq酶及模板DNA；
3. 扩增程序：95℃预变性2分钟，随后45个循环（95℃ 15秒，60℃ 30秒）。
实验需在独立PCR实验室进行，避免气溶胶污染。若样本存在抑制剂（如腐殖酸），需通过稀释或纯化处理DNA。
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