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线性校准荧光微球标准物质（PE混标）

BW036117

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6mL

海岸鸿蒙

3.0~3.4μm 1×10^7粒/mL

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线性校准荧光微球标准物质（PE混标）介绍：

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GB/T 40181-2021 流式细胞仪用荧光微球在细胞计数和大小评价中的应用

标准名称及标准号

GB/T 40181-2021《流式细胞仪用荧光微球在细胞计数和大小评价中的应用》

适用范围

适用于使用荧光微球（包括PE标记微球）对医用流式细胞仪进行线性校准和性能验证。规定了使用荧光微球进行仪器校准、线性范围验证、细胞计数和粒径分析的标准化流程。

核心检测方法

1. 线性校准方法：使用含多浓度梯度的荧光微球建立信号强度-浓度标准曲线
2. 动态范围测试：通过系列稀释微球评估仪器检测上限和下限
3. 粒径分辨率分析：使用不同粒径微球评估仪器的物理分辨率
4. 荧光强度稳定性测试：连续运行微球样品评估仪器重复性

检出限与定量限

1. 检出限(LOD)：≥100个微球/μL（信噪比S/N≥3）
2. 定量限(LOQ)：≥500个微球/μL（相对标准偏差RSD≤15%）
3. 线性范围：10²-10⁶个微球/μL（R²≥0.98）
4. 粒径检测下限：0.5μm（使用488nm激发光时）

质控样品要求

1. 微球直径变异系数(CV)≤5%
2. 荧光强度CV≤3%（同批次）
3. PE荧光素稳定性：4℃避光保存下6个月内信号衰减≤10%
4. 浓度标定误差≤5%（经计量机构认证）
5. 无菌无支原体污染（细胞实验用）

关键实验步骤

1. 仪器预热：激光器稳定运行≥30分钟
2. 微球混悬：使用涡旋振荡器充分混匀≥2分钟
3. 梯度稀释：用PBS缓冲液进行10倍系列稀释（至少5个浓度点）
4. 上样速度控制：保持≤60μL/min的低流速
5. 数据采集：每个浓度点采集≥10,000个微球事件
6. 清洗程序：每次运行后用0.5%次氯酸溶液冲洗流路

特别说明

1. 校准频率要求：首次使用前校准，之后每3个月或仪器维修后必须重新校准
2. 微球选择原则：粒径分布应与待测细胞相匹配
3. 荧光补偿校正：多色检测时需用单染微球进行补偿矩阵设置
4. 环境控制：操作温度保持20-25℃，避免强光直射
5. 数据验证：每次校准需记录CV值、线性回归方程和R²值

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