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不动杆菌属_
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不动杆菌属

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不动杆菌属


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1. 适用范围

适用于临床样本、环境样本及食品中不动杆菌属的分离鉴定及耐药性检测,重点针对鲍曼不动杆菌、醋酸钙不动杆菌等常见致病菌的实验室检测流程[3]。

2. 核心检测方法

生化鉴定法:通过氧化酶阴性、触酶阳性、硝酸盐还原阴性等特性进行初步筛选[3]。

分子检测法:采用荧光定量PCR技术,针对16S rRNA或特异性基因片段进行快速鉴定[6]。

3. 检出限与定量限

培养法:最低检出限为102 CFU/mL(血平板或麦康凯培养基)[3]。

荧光定量PCR:定量限为101~103 copies/μL(需验证引物特异性)[6]。

4. 质控样品要求

阳性对照:使用ATCC 19606(鲍曼不动杆菌标准菌株)验证检测体系准确性。

阴性对照:需包含大肠埃希菌(ATCC 25922)等非目标菌以排除交叉反应[3][6]。

5. 关键实验步骤

样本前处理:临床样本需在30分钟内接种于血平板,35℃需氧培养18~24小时[3]。

核酸提取:采用蛋白酶K裂解法提取DNA,确保A260/280比值为1.8~2.0[6]。

6. 特别说明

鲍曼不动杆菌在42℃环境下仍可生长,此特性可用于区分其他不动杆菌属菌种[3];荧光定量PCR需设置熔解曲线分析以避免非特异性扩增[6]。

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