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转基因玉米NK603质粒分子标准物质

GBW10086

Plasmid DNA Containing Genetically Modified NK603 Maize DNA Fragments

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500μL/瓶

中国计量院

测序比值： 1.00，U=0.04（k=2）；PCR比值：1.00,U=0.08（k=2）;拷贝数浓度（2.30±0.21）×10^8copies/ul

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转基因玉米NK603基体标准物质
GBW(E)100685 | 见证书

转基因玉米NK603质粒分子标准物质介绍：

浓度/纯度/标准值：测序比值： 1.00，U=0.04（k=2）；PCR比值：1.00,U=0.08（k=2）;拷贝数浓度（2.30±0.21）×10^8copies/ul
使用注意事项：使用前应先从冰箱内取出，待完全溶解后再打开瓶盖使用。样品开封后，应尽快恢复密封状态。使用本标准物质制作标准曲线时，按照表1进行梯度稀释，然后再采用荧光定量PCR进行检测，引物和探针序列[2, 3]详见表2。
特征形态：液态
主要分析方法：测序法# 数字PCR方法#
定值单位：中国计量科学研究院#
规格：500μL/瓶
定级证书量值信息：

	标准值	不确定度	单位
质粒分子浓度	2.40	0.14	10⁸拷贝数/微升
测序比值	1.00	0.04	基因比值
PCR比值	0.97	0.09	基因比值

应用领域：食品/食品添加剂及限量物质
保存条件：置于-70˚C冰箱中冷冻保存
研制单位名称：中国计量科学研究院

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国家标准《转基因产品检测核酸定量检测方法》

标准名称	转基因产品检测核酸定量检测方法
适用范围	适用于转基因玉米NK603等作物的核酸定量检测，涵盖DNA提取、实时荧光PCR分析等流程
核心检测方法	实时荧光定量PCR技术，针对NK603特异性序列（如P-35S启动子、Cry1Ab基因）设计引物与探针
检出限与定量限	检出限为0.1%（质量分数），定量限为0.5%（质量分数），需通过标准曲线验证灵敏度
质控样品要求	需包含阴性对照、阳性对照及空白对照；阳性对照应为已知浓度的NK603标准物质
关键实验步骤	1. DNA提取纯化（CTAB法或试剂盒法）； 2. 实时荧光PCR扩增； 3. 数据分析（标准曲线法计算拷贝数比值）
特别说明	需验证引物特异性，避免非靶标序列扩增；实验环境须符合PCR防污染要求

行业标准 NY/T 672-2020《转基因植物及其产品检测通用要求》

标准名称	转基因植物及其产品检测通用要求
适用范围	规范转基因玉米等作物的检测流程，包括采样、DNA提取、数据分析等通用技术要求
核心检测方法	基于核酸的PCR技术，要求同时检测内源基因（如玉米Zein基因）及外源转基因成分
检出限与定量限	未规定具体数值，但要求检测方法需达到国际等效水平（如欧盟ENGL指南）
质控样品要求	样品均质化处理需满足粒径≤0.5mm；检测批次中至少包含10%平行样
关键实验步骤	1. 样品研磨与均质化； 2. DNA浓度与纯度检测（A260/A280比值1.7-2.0）； 3. 多重PCR验证体系兼容性
特别说明	检测报告需包含检测方法、引物信息、质控数据及结果判定依据

国家标准 GB/T 35834-2018《转基因植物检测核酸标准物质制备技术规范》

标准名称	转基因植物检测核酸标准物质制备技术规范
适用范围	规定转基因标准物质（如NK603质粒）的制备、定值与验证要求
核心检测方法	通过数字PCR或定量质谱法对标准物质进行绝对定量，确保拷贝数溯源性
检出限与定量限	标准物质不确定度需≤5%，定值结果需经至少3家实验室协同验证
质控样品要求	标准物质应包含目标序列、内源基因及载体骨架的完整信息
关键实验步骤	1. 质粒构建与测序验证； 2. 大规模制备与纯化； 3. 均匀性与稳定性测试
特别说明	标准物质需标注储存条件（-20℃以下）及有效期（通常≤2年）

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