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大肠杆菌stx2基因检测质粒DNA标准物质

GBW(E)100460

Plasmid DNA Reference Materials for Diarrheagenic Escherichia coli stx2 Gene Detection

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透明塑料离心管

萘析精选

68.6【质量浓度(ng/μL)】/不确定度：6.8

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萘标准物质
SDS139015M | 20.51%V/V

大肠杆菌stx2基因检测质粒DNA标准物质介绍：

使用注意事项：使用前于室温平衡30 min，然后轻轻打开瓶盖，用经过校准的A级移液管/器准确量取本标准物质。工作标准物质一旦打开，请在短期内使用完毕。
特征形态：固态
主要分析方法：紫外分光光度法#高分辨电感耦合等离子体质谱法（HR-ICP-MS）
定值单位：上海市计量测试技术研究院
规格：透明塑料离心管
定级证书量值信息：

	标准值	相对不确定度(%)	单位	CAS	备注
大肠杆菌stx2基因检测质粒DNA	68.6	6.8	质量浓度(ng/μL)

保存条件：置于干燥、-15C ~-20C条件下保存
研制单位名称：上海市计量测试技术研究院

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国家标准实验室质量控制规范

标准名称	GB/T 27403-2008 实验室质量控制规范食品分子生物学检测
适用范围	适用于食品中致病微生物（如大肠杆菌stx2基因）的分子生物学检测实验室质量控制，包括核酸提取、扩增及结果判读全流程。
核心检测方法	实时荧光定量PCR法（qPCR），需使用质粒DNA标准物质建立标准曲线，验证引物探针特异性。
检出限与定量限	检出限（LOD）为10拷贝/反应，定量限（LOQ）为50拷贝/反应，需通过连续稀释验证。
质控样品要求	每批次实验需包含阴性对照、阳性对照（含stx2基因的质粒DNA）及空白对照，阳性对照浓度需覆盖定量限范围。
关键实验步骤	1. 质粒DNA标准品梯度稀释； 2. 反应体系优化（退火温度、引物浓度）； 3. 扩增效率计算（要求90%-110%）。
特别说明	实验环境需严格分区（试剂准备区、样品处理区、扩增区），防止交叉污染；所有耗材需经DNase/RNase灭活处理。

行业标准出口食品致病菌检测方法

标准名称	SN/T 1870-2016 出口食品中致病菌检测方法实时荧光PCR法
适用范围	针对出口食品中产志贺毒素大肠杆菌（STEC）的stx2基因快速筛查，适用于生鲜肉类、乳制品等基质。
核心检测方法	双重实时荧光PCR法，同时检测stx1和stx2基因，需使用质粒DNA标准品进行交叉验证。
检出限与定量限	检出限为15 CFU/g（样品中活菌），定量限为50 CFU/g，需通过加标回收实验确认。
质控样品要求	每批次需包含基质匹配质控样（阴性/阳性），阳性样品需包含10^2-10^5 CFU/g浓度梯度。
关键实验步骤	1. 样品前处理（增菌培养18-24小时）； 2. 基因组DNA提取（磁珠法或酚-氯仿法）； 3. 扩增程序设置（双重荧光通道同步检测）。
特别说明	需验证食品基质抑制效应，当Ct值＞35时需进行序列确认；阳性结果需结合培养法复验。

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