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转基因玉米DBN9936基体标准物质_
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转基因玉米DBN9936基体标准物质

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转基因玉米DBN9936基体标准物质介绍:


特征形态:液态
定值单位:农业农村部科技发展中心#中国农业科学院油料作物研究所#天津市农业科学院
定级证书量值信息:
标准值不确定度 (copies/copies)(%)单位CAS备注
转基因玉米100.96.1DBN9936转化体/zSSIIb拷贝数比值(copies/copies)(%)

研制单位名称:农业农村部科技发展中心#中国农业科学院油料作物研究所#天津市农业科学院

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

标准名称
GB/T 19495.5-2018 转基因植物及其产品成分检测 实时荧光PCR方法
适用范围
适用于玉米、大豆等转基因作物中特定外源基因(如DBN9936的Cry1Ab基因)的定性检测,覆盖原料、加工品及终产品的核酸提取与扩增分析。
核心检测方法
采用TaqMan探针法进行实时荧光PCR检测,通过特异性引物与探针组合,定量检测目标基因拷贝数,同步设置内源基因(如玉米ZSSIIb)作为阳性对照。
检出限与定量限
检出限(LOD)为0.01%(质量分数),定量限(LOQ)为0.1%,要求标准曲线R²≥0.98,扩增效率90%-110%。
质控样品要求
需包含阴性对照(非转基因玉米)、阳性对照(DBN9936标准物质)及空白对照(无模板),阳性对照需覆盖目标基因和内源基因,且CT值偏差不超过±1.5。
关键实验步骤
1. 样品研磨至粒径≤150 μm;
2. CTAB法提取DNA,A260/A280比值1.8-2.0;
3. 实时PCR反应体系包含10 ng/μL DNA模板;
4. 扩增程序:95℃预变性5分钟,随后45个循环(95℃ 10秒,60℃ 30秒)。
特别说明
1. 需验证引物特异性,排除非目标基因交叉反应;
2. 每批次检测需重新绘制标准曲线;
3. 当样品CT值≥35时,需重复检测并确认扩增曲线形态;
4. 实验环境应符合GB/T 27403-2008要求,避免气溶胶污染。

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