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转基因玉米DBN9936基体标准物质_
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转基因玉米DBN9936基体标准物质

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转基因玉米DBN9936基体标准物质介绍:


特征形态:液态
定值单位:农业农村部科技发展中心#中国农业科学院油料作物研究所#天津市农业科学院
定级证书量值信息:
标准值不确定度 (copies/copies)(%)单位CAS备注
转基因玉米3.490.33DBN9936转化体/zSSIIb拷贝数比值(copies/copies)(%)

研制单位名称:农业农村部科技发展中心#中国农业科学院油料作物研究所#天津市农业科学院

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国家标准解读
标准名称 GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光PCR方法
适用范围 适用于玉米、大豆等转基因作物及其加工产品中特定基因序列的定性和定量分析,包括DBN9936品系的特异性检测。
核心检测方法 基于实时荧光PCR技术,通过设计特异性引物和探针,对目标基因(如CaMV 35S启动子、NOS终止子)进行扩增和荧光信号采集。
检出限与定量限 检出限(LOD)为0.1%(质量分数),定量限(LOQ)为0.5%(质量分数),需通过标准曲线验证。
质控样品要求 必须包含阳性对照(含目标序列)、阴性对照(非转基因样品)和空白对照(无模板),验证实验特异性与抑制效应。
关键实验步骤 1. DNA提取(CTAB法或试剂盒法);
2. 引物/探针设计与验证;
3. PCR反应体系优化;
4. 荧光信号阈值设定与Ct值分析。
特别说明 实验需在独立分区进行以防止污染,建议使用UNG酶防交叉污染体系;数据判读需符合扩增效率(90%-110%)和R²≥0.98的要求。
行业标准解读
标准名称 SN/T 1204-2016 植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检测方法
适用范围 适用于玉米、大豆等原料及其深加工产品(如淀粉、油脂)的转基因成分筛查,包括DBN9936品系的定性判定。
核心检测方法 采用实时荧光PCR技术,针对品系特异性序列(如DBN9936的旁侧序列)设计引物,通过熔解曲线分析确认扩增特异性。
检出限与定量限 定性检测,检出限为0.1%(质量分数),不涉及定量限;需通过阴性样本验证无假阳性。
质控样品要求 每批次实验需包含已知阴性/阳性对照,且阳性对照的Ct值应在预期范围内(±1个循环)。
关键实验步骤 1. 样品DNA纯化(避免多糖、多酚干扰);
2. 反应程序优化(退火温度、循环次数);
3. 熔解曲线分析(Tm值偏差≤1.5℃)。
特别说明 深加工样品需增加DNA片段完整性检测(如电泳);若Ct值≥35且熔解曲线异常,需重复实验或改用其他方法验证。

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