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线性校准荧光微球标准物质(FITC)_
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线性校准荧光微球标准物质(FITC)

BW036001~BW036006 {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 1mL*6瓶 {{goodObj.date}} 海岸鸿蒙 {{item.norm}} 3.0~3.4μm 1×10^7粒/mL {{inventory}}
线性校准荧光微球标准物质(FITC)介绍:

本标准物质为线性校准荧光微球标准物质,主要用于流式细胞仪FITC通道的线性校准、光路校直,灵敏性、稳定性检测,实验室质量控制,评价和检验分析方法,考核人员操作水平。

一、样品制备

本标准物质采用分散聚合制备3.0~3.4μm的单分散聚苯乙烯空白微球,将荧光染料包覆于空白微球内得到5种荧光微球。将其均匀分散于加有少量稳定剂的纯水中配制成悬浮液,在洁净条件下进行分装。本标准物质共6瓶(含1瓶空白微球),每瓶≥1mL,参考浓度为1×107/mL

二、溯源性及定值方法

本标准物质的粒径采用扫描电子显微镜结合图像分析法进行定值,定值结果可溯源至国家长度基准。荧光强度的定值采用荧光分光光度计,并采用流式细胞仪BDFACSAriaTMⅡ进行验证。

三、特性量值及不确定度

本标准物质粒径定值结果:

编号

数量中值粒径

数量均值粒径

不确定度,k=2

变异系数

BW036001-036006

3.2µm

3.3µm

4%

3.7%

荧光强度定值结果:

编号

MESF[a]

BW036002

4600±200

BW036003

14200±600

BW036004

44500±1900

BW036005

144000±5800

BW036006

321000±12700

[a]等量可溶性荧光分子。

四、均匀性检验及稳定性考察

根据国家《一级标准物质》技术规范,对该标准物质样品随机抽样进行均匀性和稳定性检验,结果表明标准物质的均匀性、稳定性良好。该标准物质自定值日期起,有效期为1年。

五、包装、储存及使用

本标准物质采用避光塑料瓶包装,冷藏、避光保存,运输时应有冷藏和防碎裂保护。使用前要将样品充分分散均匀,滴加至PBS缓冲液中,混匀后使用。

六、安全警示

本标准物质中含少量防腐剂,切勿入口。


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国家标准解读:荧光校准相关标准
标准名称及标准号 GB/T 37862-2019《分子生物学检测中荧光定量PCR仪性能验证通则》
GB/T 34826-2017《流式细胞仪校准规范》
适用范围 GB/T 37862-2019适用于荧光定量PCR仪的性能验证,包含荧光信号校准方法;
GB/T 34826-2017规范流式细胞仪校准流程,明确荧光微球用于光学系统校准。
核心检测方法 1. 荧光强度线性校准:使用梯度稀释的荧光微球建立标准曲线;
2. 光学通道灵敏度测试:通过微球荧光信号评估仪器检测限。
检出限与定量限 依据GB/T 34826-2017,检出限需通过低荧光强度微球(如<500 MESF)验证,定量限需满足RSD≤5%。
质控样品要求 1. 微球粒径均一性(CV<3%);
2. 荧光强度批次稳定性(偏差<5%);
3. 需附带可溯源的校准证书。
关键实验步骤 1. 微球悬液制备:按标准浓度稀释,避免聚集;
2. 仪器预热及光路校正;
3. 多通道荧光信号采集(至少3次重复);
4. 数据拟合与线性范围判定(R²≥0.99)。
特别说明 1. FITC微球需避光保存,使用前平衡至室温;
2. 校准过程需同步检测空白对照;
3. 不同仪器型号需匹配特定粒径的微球(如流式细胞仪常用6μm)。

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