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5-甲基胞嘧啶_554-01-8
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5-甲基胞嘧啶

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5-甲基胞嘧啶介绍:


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5-甲基胞嘧啶

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国家标准GB/T 34782-2020关联解读
标准名称及标准号 GB/T 34782-2020《分子生物学检测用核酸修饰5-甲基胞嘧啶测定 高效液相色谱法》
适用范围 适用于动植物组织、血液、微生物等生物样本中基因组DNA的5-甲基胞嘧啶含量检测
核心检测方法 采用HPLC-UV联用技术,通过酶解将DNA转化为单核苷酸,C18反相色谱柱分离,检测波长280nm
检出限与定量限 检出限0.05%甲基化水平,定量下限0.2%(以总胞嘧啶含量计)
质控样品要求 要求使用标准甲基化DNA(0%、50%、100%梯度)进行全程质控,每批次检测需包含空白对照
关键实验步骤 1. DNA酶解(需37℃水浴6小时)
2. 离心纯化(14000×g,4℃)
3. 色谱条件优化(流动相pH值控制在5.0±0.1)
特别说明 禁止使用含SDS的裂解液处理样本,色谱柱温度需保持30±1℃,同一样品三次平行测定RSD应≤15%

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