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CAMV35S

NHC0072

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200uL

钢研纳克

见证书

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CAMV35S介绍：

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准解读：

标准名称及标准号

转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应（PCR）检测方法
GB/T 19495.4-2018

适用范围	适用于植物源性食品中转基因成分的定性检测特别针对含CaMV 35S启动子的转基因成分（如CAMV35S）覆盖谷物、油料、饲料等样品基质

核心检测方法

TaqMan探针实时荧光PCR技术
特异性引物设计：针对CaMV 35S启动子保守区域
双重PCR体系：同时检测目标基因（CAMV35S）和内参基因

检出限与定量限

检出限(LOD)：0.1%转基因成分含量
定量限(LOQ)：0.5%转基因成分含量
要求Ct值≤36时判定为阳性

质控样品要求

阳性对照：含CaMV 35S启动子的标准物质
阴性对照：非转基因同源物种
空白对照：无DNA模板的PCR反应体系
每批次检测需包含所有质控样本

关键实验步骤

1. DNA提取：CTAB法或等效方法，OD260/280=1.7~2.0
2. 反应体系：20μL体系含10μL PCR mix，引物/探针终浓度400nM/200nM
3. 扩增程序：95℃ 5min → (95℃ 15s → 60℃ 1min)×45循环
4. 阈值设定：荧光信号超过基线标准差10倍

特别说明	• CaMV病毒天然存在风险：需同步检测P35S-T35S连接区避免假阳性 • 引物特异性验证要求：至少覆盖10个非靶标物种 • 设备校准：PCR仪光学校准需每季度执行 • 防污染措施：DNA提取区与PCR扩增区物理隔离

行业标准补充：

标准名称	植物转基因成分检测实时荧光PCR定性检测方法

方法差异	要求DNA浓度≥10ng/μL 设定熔解曲线分析步骤(60~95℃) 增加电泳验证环节（阳性样本需条带验证）

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！