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肝素免疫亲和柱(水解蛋白专用柱)

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肝素免疫亲和柱(水解蛋白专用柱)介绍:

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国标解读: 食品安全国家标准 食品中多种磷酸盐的测定
标准名称及标准号 GB 5009.256-2016《食品安全国家标准 食品中多种磷酸盐的测定》
本标准适用于食品中焦磷酸盐、三聚磷酸盐等磷酸盐的检测,肝素免疫亲和柱用于样品前处理中的特异性富集纯化。
适用范围 1. 食品类型:肉制品、水产品、乳制品等加工食品
2. 检测目标:焦磷酸盐、三聚磷酸盐等7种磷酸盐添加剂
3. 适用场景:食品安全监督抽检、企业原料验收及生产过程控制
核心检测方法 1. 前处理:肝素免疫亲和柱特异性吸附水解蛋白中的磷酸盐
2. 分离技术:离子色谱法(IC)分离目标物
3. 检测器:电导检测器定量分析
4. 方法原理:磷酸盐与肝素亲和柱的磺酸基团特异性结合,洗脱后经色谱分离检测
检出限与定量限
化合物 检出限(LOD, mg/kg) 定量限(LOQ, mg/kg)
焦磷酸盐 1.0 3.0
三聚磷酸盐 1.5 5.0
其他磷酸盐 0.8-2.0 2.5-6.0
质控样品要求 1. 空白基质:磷酸盐含量<LOQ的同类食品基质
2. 加标水平:LOQ、2倍LOQ、10倍LOQ三个浓度梯度
3. 回收率范围:80%-110%
4. 平行样:每批次≥10%样品做双平行测定
关键实验步骤 1. 样品处理:样品均质后加入提取液(0.1mol/L HCl)振荡提取
2. 亲和柱净化
  - 肝素免疫亲和柱活化:5mL甲醇+5mL纯水
  - 上样:2mL提取液过柱(流速1mL/min)
  - 淋洗:3mL纯水去除杂质
  - 洗脱:5mL 0.5mol/L NaCl溶液收集目标物
3. 色谱条件
  - 色谱柱:AS11-HC阴离子交换柱(250×4mm)
  - 流动相:KOH梯度洗脱(0-40min, 1-60mmol/L)
  - 流速:1.0mL/min,柱温30℃
特别说明 1. 肝素免疫亲和柱保存条件:2-8℃冷藏,不可冻结
2. 柱容量限制:单柱最大吸附量≤5μg磷酸盐,超量需减少上样体积
3. 干扰排除:Ca²⁺浓度>100mg/L时需增加EDTA掩蔽步骤
4. 方法优势:特异性消除蛋白质水解产物的基质干扰
5. 适用性验证:需对不同食品基质进行专属性和回收率验证

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