动物源性饲料中兔源性成分定性分析质控样GB/T21102-2007
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1. 基本信息
2. 特性值
3. 说明
本质控样仅供实验室研究与分析测试工作使用,因用户使用或储存不当所引起的投诉,不予承担责任。
收到后请立即核对品种、数量和包装,相关赔偿只限于样品本身,不涉及其他任何损失。
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GB/T 21102-2007《动物源性饲料中兔源性成分定性检测方法》
适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混料中兔源性成分的定性检测,检测下限为0.1%(质量分数)。不适用于深加工产品(如水解蛋白、骨胶等)。
采用PCR扩增技术,针对兔源性物种特异性线粒体DNA片段(细胞色素b基因)进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳确认目标条带(预期片段长度约271bp)。
检出限:0.1%(质量分数),即样品中兔源性成分含量≥0.1%时可被可靠检出。
定量限:本标准为定性检测方法,不涉及定量限要求。
1. 阳性对照:已知兔源性成分的标准物质或DNA提取物
2. 阴性对照:不含兔成分的饲料基质
3. 空白对照:无菌水替代DNA模板
4. 灵敏度对照:含0.1%兔源性成分的样品
1. DNA提取:采用CTAB法或等效试剂盒提取样品DNA
2. PCR扩增:94℃预变性5min → 94℃ 30s/58℃ 30s/72℃ 30s(35循环)→ 72℃延伸7min
3. 电泳分析:取5μL扩增产物在2%琼脂糖凝胶电泳(电压5V/cm),EB染色后紫外成像
4. 结果判读:阳性样品应在271bp位置出现清晰条带,阴性对照无此条带
1. 实验需在独立PCR实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样品处理区、扩增区)
2. 避免交叉污染,所有耗材需经高压灭菌且不含DNA酶
3. 当样品电泳出现非特异性条带时,需通过测序确认目标片段
4. 深加工饲料可能因DNA降解导致假阴性,需增加内参基因检测验证DNA提取质量
以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!