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肠沙门氏菌肠亚种肠炎血清型DNA标准品

BNCC392221

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冻存管；(6.2±1.5)×10^6copies/mL；单管

北纳生物/BNCC

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肠沙门氏菌肠亚种肠炎血清型DNA标准品介绍：

产品中文名称：肠沙门氏菌肠亚种肠炎血清型DNA标准品
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形态特性：/
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提供形式：冻存管；(6.2±1.5)×10^6copies/mL；单管
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食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验

标准名称及标准号	GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》
适用范围	适用于食品、食品添加剂及生产环境样品中沙门氏菌的定性检测，包括肠沙门氏菌肠亚种肠炎血清型
核心检测方法	1. 前增菌培养（缓冲蛋白胨水） 2. 选择性增菌培养（TTB/SC培养基） 3. 分离培养（BS/XLD平板） 4. 生化鉴定（三糖铁/赖氨酸脱羧酶试验） 5. 血清学鉴定（O多价/H多价血清）附录B规定PCR方法（适用DNA标准品）
检出限与定量限	• 定性检测：最低检出限为1CFU/25g(mL)样品 • PCR方法：DNA模板最低检出限为10-100拷贝/反应 • 不涉及定量限（定性标准）
质控样品要求	• 阳性对照：肠炎沙门氏菌标准菌株（ATCC 13076）或DNA标准品 • 阴性对照：大肠埃希氏菌标准菌株（ATCC 25922） • 每批次实验需同步进行阴阳性对照 • DNA标准品应溯源至国家计量标准
关键实验步骤	1. 样品预处理：无菌操作称取25g样品+225mL BPW 2. 增菌培养：36℃±1℃培养18h±2h 3. 分离培养：转种TTB/SC二次增菌后划线BS/XLD平板 4. 可疑菌落筛选：挑取黑色/粉红色菌落进行生化试验 5. PCR检测（附录B）： - DNA提取（煮沸法/试剂盒） - 引物设计：invA基因特异性引物 - 反应体系：含DNA标准品阳性对照 - 循环条件：95℃预变性5min；40循环（95℃ 15s，60℃ 60s）
特别说明	• PCR方法仅作为筛选手段，阳性结果需传统培养确认 • 血清分型需使用国家标准菌种保藏中心提供的标准血清 • 肠炎沙门氏菌检测需增加Vi抗原鉴定 • 实验废弃物需121℃高压灭菌30分钟处理

实验室质量控制规范食品分子生物学检测

标准名称及标准号	GB/T 27403-2008《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》
适用范围	规范食品检测实验室中分子生物学方法（PCR/实时荧光PCR等）的质量控制要求
核心质控要求	• 标准物质管理：DNA标准品需有可溯源的证书 • 防污染措施：PCR前/后分区操作，紫外消毒 • 方法验证：新方法需验证特异性/灵敏度 • 人员能力：分子生物学专项培训记录
特别说明	• DNA标准品应保存在-20℃以下，避免反复冻融 • 每批次PCR必须包含阴性对照（无模板对照） • 当Ct值≥35时需谨慎判读结果

出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法

标准名称及标准号	SN/T 1870-2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》
适用范围	适用于食品中沙门氏菌等致病菌的快速筛查检测
方法特点	• 检测靶基因：沙门氏菌特异基因invA • 全程检测时间：≤24小时 • 检测限：10-100 CFU/mL（增菌后）
特别说明	• 阳性结果需通过国际标准ISO 6579确认 • 引物探针序列见标准附录A • 适用DNA标准品作为阳性对照

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