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大肠埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7CICC 10907(GB 4789.28-2013)_
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大肠埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7CICC 10907(GB 4789.28-2013)

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大肠埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7CICC 10907介绍:

  • 平台资源号:1511C0005000010978
  • 菌株保藏编号:CICC 10907
  • 中文名称:大肠埃希氏菌O157
  • 拉丁名称:
  • 模式菌株: 否
  • 其它保藏中心编号:=NCTC 12900=ATCC 700728
  • 来源历史:←英国NCTC
  • 收藏时间:2014-07-24
  • 特征特性:血清型O157:H7,山梨醇阴性,Vero 细胸毒素(志贺毒素)阴性。
  • 参考用途:BBL科玛嘉质控菌株,GB 4789.28-2013《培养基和试剂的质量要求》标准菌株。
  • 生物危害程度:四类
  • 致病对象:无

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大肠埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7CICC 10907培养条件:

  • 培养基:0002 营养肉汤琼脂(Nutrient Agar)
  • 蛋白胨          5.0 g
    牛肉浸粉3.0 g
    NaCl5.0 g
    琼脂15.0 g
    蒸馏水1000.0 mL
    pH7.0

    培养芽胞杆菌时加入5 mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽胞。以上成分121℃,灭菌15 min。液体培养基不添加琼脂。推荐使用成品培养基。
  • 培养温度:37 ℃
  • 需氧类型:好氧
大肠埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7CICC 10907参考文献:

  1. 翟磊, 谢九艳, 姚粟, 等. 菌株 CICC 6294 生物学特性及其在辣椒发酵中的应用[J]. 食品与发酵工业, 2018, 44( 7) : 116 -121
  2. 姜华, 焦阳, 李远宏, 等. 多重 PCR 检测婴幼儿配方奶粉中3 种食源性致病菌[J]. 食品工业科技, 2018, 39(14):213-218
  3. Q. S. Xiang, C. D. Kang, D. B. Zhao, et al. Influence of organic matters on the inactivation efficacy of plasma-activated water against E. coliO157:H7 and S. aureus[J]. Food Control. 2019, 99:28-33
  4. 吕????新,刘兰英,陈丽华. 沙门氏菌 LAMP 检测方法的建立及其在蔬菜 栽培土壤中的应用[J]. 福建农业学报

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一、适用范围

本标准(GB 4789.36-2016)适用于食品中大肠埃希氏菌O157:H7/NM的检验,涵盖样品前处理、增菌培养、分离鉴定、血清学试验等全流程,适用于各类食品基质中目标菌的定性检测[2][3]。

二、核心检测方法

检测方法包括:
1. 增菌培养:使用改良EC肉汤(mEC+n)进行选择性增菌(36℃±1℃,18-24小时)
2. 分离培养:采用CT-SMAC琼脂平板分离可疑菌落(36℃±1℃,18-24小时)
3. 生化鉴定:通过三糖铁琼脂(TSI)等生化反应初步筛选
4. 血清学鉴定:O157和H7特异性抗血清凝集试验[3][5]

三、检出限与定量限

本标准为定性检测方法,未明确量化检出限。实际检测中,样品经增菌后需在CT-SMAC平板上观察到典型菌落(无色、中心呈棕褐色),并通过后续验证实验确认目标菌存在[3][8]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照:使用标准菌株(如NCTC12900)验证检测流程有效性
2. 阴性对照:采用非目标菌株(如ATCC25922)排除交叉反应
3. 空白对照:包含培养基和试剂的无菌对照,确保无污染[8][9]

五、关键实验步骤

1. 样品处理:25g样品+225mL改良EC肉汤均质,36℃增菌培养
2. 平板分离:取增菌液划线CT-SMAC琼脂,观察典型菌落特征
3. 生化验证:TSI斜面反应(底层黄色/斜面红色,H₂S阴性)
4. 免疫学确认:O157多价抗血清凝集试验,H7鞭毛抗原检测[2][3][5]

六、特别说明

1. 需在生物安全二级实验室操作,防止气溶胶污染
2. CT-SMAC培养基需验证其选择性,避免杂菌干扰
3. 血清凝集试验需同时进行自凝对照,排除假阳性
4. 对山梨醇阴性菌落需进一步验证,避免漏检变异株[3][5][8]
[2] 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验 [3] 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验标准文本 [5] 大肠埃希氏菌O157:H7能力验证结果分析及讨论 [8] 大肠埃希氏菌O157:H7方法学验证报告 [9] 食品中大肠埃希氏菌O157:H7能力验证结果分析与讨论

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