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NOS终止子/油菜

NYB2321

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100μL

中国农业科学院

3.5×103 ± 0.3×103

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NOS终止子介绍：

NOS终止子

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与NOS终止子相关的标准解读

标准名称：转基因产品检测实时荧光PCR方法

适用范围：
适用于植物及其加工产品中转基因成分的定性检测，包含对NOS终止子（nopaline synthase terminator）的特异性检测

关联内容：
• 规定引物探针序列（如F:5'-GCCGCTACCGCTCAAGAC-3', R:5'-GCCGCTACCGCTCAAGAC-3'）
• 明确退火温度58±2℃、扩增循环数≤45的参数要求
• 要求通过熔解曲线验证产物特异性（Tm值应稳定在84±1℃）

检出限：
方法检测下限为10拷贝/反应（相当于0.1%含量水平），定量检测时要求标准曲线R²≥0.98

标准名称：植物及其加工产品中转基因成分检测普通PCR和实时荧光PCR方法

适用范围：
适用于大豆、玉米等农产品中转基因成分筛查，特别规定了对常见遗传元件（含NOS终止子）的检测流程

关联内容：
• 明确模板DNA浓度要求（10-50 ng/μL）
• 规定阴性对照必须包含非转基因材料
• 要求设置阳性对照（含NOS终止子的质粒标准物质）

检出限：
普通PCR检测限为0.5%（w/w），实时荧光PCR可达0.1%（w/w）

技术要点说明

• NOS终止子检测通常作为转基因筛查的靶标之一，常与CaMV 35S启动子联合检测
• 实际检测中需注意区分非特异性扩增，特别是当样品中存在农杆菌污染时
• 不同物种的基因组DNA可能影响扩增效率，需进行物种适用性验证

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