MR-VP培养基/用于大肠杆菌的甲基红实验和VP实验
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操作视频|MR-VP实验
用途:用于大肠杆菌的甲基红试验和VP试验。
成分(g/L):
月示胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。
用法:
称取本品 1.7g,加热溶解于100ml 蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌 15 分钟备用。
试验方法:
1、甲基红(MR)试验
取适量琼脂培养物接种于缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP),36 ℃±1 ℃培养2 d~5 d。滴加甲基红试剂(此试剂需另行购买)一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性。
2、V-P试验
取适量琼脂培养物接种于缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP),36 ℃±1 ℃培养2 d~4 d,滴加V-P试剂盒(此试剂需另行购买)充分振摇试管,观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36℃±1 ℃继续培养4 h 再进行观察。
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2. **VP试验**:检测细菌代谢葡萄糖生成乙酰甲基甲醇的能力。阳性反应(红色)表明生成中性产物,如产气肠杆菌;阴性则无颜色变化[5][7]。
- **阳性对照**:大肠埃希氏菌(MR阳性/VP阴性);
- **阴性对照**:产气肠杆菌(MR阴性/VP阳性);
- **特殊对照**:单增李斯特氏菌(MR/VP双阳性)[5][9]。
2. **接种与培养**:接种单菌落于MR-VP肉汤,36±1℃培养48小时;
3. **指示剂添加**:MR试验滴加甲基红试剂,VP试验需加入α-萘酚和KOH试剂并振荡观察[5][7]。
2. **试剂灵敏度**:VP试验试剂需现配现用,避免氧化失效;
3. **结果判读**:部分菌株(如蜂房哈夫尼亚菌)可能出现MR/VP双阳性,需结合其他生化试验综合判断[5][7][9]。
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