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石蕊牛奶培养基/用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验_
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石蕊牛奶培养基/用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验

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石蕊牛奶培养基介绍:

操作视频|石蕊牛奶实验

用途:用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验。

成分(g/L)

脱脂奶粉 100.0
石蕊 1.67
pH值6.0-6.8  25℃

检验原理

石蕊是一种pH指示剂,在酸性溶液(pH≤4.5)呈红色,在碱性(pH>8.3)呈蓝色,培养基本色应为紫蓝色(4.5<pH≤8.3)。同时石蕊也具有可还原的性质,某些细菌能够把石蕊还原成无色。牛奶中含有酪蛋白、乳蛋白、乳球蛋白和乳糖,某些含有凝乳酶的细菌可以使牛奶凝固,这些细菌通过使酪蛋白转化成副酪蛋白,或者发酵乳糖产生大量酸使酪蛋白沉淀使牛奶凝固。还有些细菌产生脂酶,分解牛奶中的脂肪,形成黄色透明液体。另外,部分细菌具有酪蛋白水解酶,可催化酪蛋白水解,最终转化成透明液体的酪蛋白原沉淀物,整个过程称为蛋白胨化。

用法

称取本品 101.67g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,每管 5-10ml,115℃高压灭菌 20 分钟,备用。

注:成分为石蕊和奶粉,灭菌后有少量沉淀。

石蕊牛奶实验操作视频:

细菌生化试验—石蕊牛奶试验:

石蕊牛奶培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。

石蕊牛奶培养基微生物生长结果:顶部淡紫色,底部乳白色。

左:空白对照  右:唐菖蒲伯克霍尔德氏菌ATCC10248

唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检验:


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中国药典2015年版 石蕊牛奶培养基相关标准解读
适用范围 用于检查细菌对牛奶的凝固和发酵作用,适用于微生物学检测及菌种特性分析[4]。
核心检测方法 通过观察细菌在培养基中的生长现象(如凝固、产酸、产气、消化等)判断代谢特性。需设置对照管以排除培养基自身反应干扰[4]。
检出限与定量限 未明确具体数值,需通过阳性对照菌株验证灵敏度,通常要求接种量≥103 CFU/mL时呈现典型反应[4]。
质控样品要求 需同步测试标准菌株(如乳酸乳球菌)作为阳性对照,培养基灭菌后应呈均匀蓝色,无沉淀或分层现象[4]。
关键实验步骤 1. 配制比例:脱脂奶粉10g,0.65%石蕊溶液,水100ml
2. 灭菌条件:116°C灭菌10分钟
3. 接种后37°C培养24-48小时,观察颜色变化及凝固状态[4]
特别说明 灭菌后需直立放置凝固,避免震动;结果判读需区分正常凝固(均匀稠密)与异常凝固(乳清分离/气体产生)[4]

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