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国家标准解读：GB/T 37528-2019 甘草中黄酮类化合物的测定高效液相色谱法

标准名称及标准号	GB/T 37528-2019 甘草中黄酮类化合物的测定高效液相色谱法
适用范围	适用于甘草及含甘草成分的食品、药品中黄酮类化合物（包括芹糖异甘草苷、异甘草苷元-7-O-D-芹糖-4'-O-D-葡萄糖苷等）的定性及定量分析。

核心检测方法

高效液相色谱法（HPLC）采用C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱，检测波长280 nm，流速1.0 mL/min，柱温30℃。

检出限与定量限

芹糖异甘草苷检出限（LOD）为0.05 mg/kg，定量限（LOQ）为0.15 mg/kg；异甘草素二糖苷LOD为0.03 mg/kg，LOQ为0.10 mg/kg。

质控样品要求

实验需使用空白基质加标样品进行回收率验证，加标浓度覆盖目标化合物定量限至标准曲线最高点，平行样品数≥3。

关键实验步骤

1. 样品前处理：超声辅助甲醇提取，离心后过0.22 μm滤膜；
2. 色谱条件优化：需验证梯度洗脱程序对目标物的分离效果；
3. 标准曲线绘制：至少5个浓度梯度，相关系数R²≥0.999。

特别说明	异甘草素二糖苷（CAS:120926-46-7）在酸性条件下易水解，样品前处理需避免长时间暴露于酸性环境；检测结果需结合保留时间和紫外光谱双重确认。

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