标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
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标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
BePure-21712XA-1.2mL | 100μg/mL
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标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
BePure-21712XA | 100μg/mL
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标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
BePure-21712ZA-1.2mL | 500μg/mL
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标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
BePure-21712LA | 10μg/mL
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标准物质/脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)/GB 5009.111-2016
BePure-21712-5mg | 见证书
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标准物质/脱氧雪腐镰刀菌烯醇/NIVALENOL相关化合物
RMCN121001-1mg | 见证书
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蒽-D10
BW908001 | 98.1%
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乙醇
H17537A | AR,95%
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乙醇
H17537A-500mL | 95%
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标准物质/乙腈
400641646 | ≥9 HPLC 基础款 9.9%
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标准物质/乙腈中雪腐镰刀菌烯醇
BePure-24328XA | 100μg/mL
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标准物质/乙腈中雪腐镰刀菌烯醇
BePure-24328YA | 1000µg/mL
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乙腈中三唑磷标准品
NCS1601335-100B2 | 100ug/mL
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水中2'-岩藻糖基乳糖（2'-FL）溶液
NCSG1603380-10000C | 10mg/mL
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水中乳糖-N-新四糖（LNnT）溶液
NCSG1603385-3000C | 3000μg/mL
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水中昆布三糖溶液
NCSG1603694-2000C | 2000ug/mL
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二氯甲烷甲醇中MK-9溶液
NCS1603698-500A | 0.5mg/mL
GB 5009.111-2016食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定应用
来源与性质:呕吐毒素，又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇，化学名为3α, 7α, 15-三羟基-12,13-环氧单端孢霉-9-蒽-8-酮，属单端孢霉烯族化合物，由于它可以引起猪的呕吐而得名。呕吐毒素主体成分为DON（deoxynivalenol, 脱氧雪腐镰刀菌烯醇），属于单端孢霉烯族化合物，主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外，头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种，是一类强有力免疫抑制剂，所引起典型症状是采食量降低，所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素（DON）是其中最重要一种毒素，主要来自镰刀菌属（Fusarium），尤其是禾谷镰刀菌（Fusariumgraminearum）和黄色镰刀菌（Fusarium culmorum）。
法律与法规：呕吐毒素是食品中常见的真菌毒素，在自然界中广泛存在，通常在欧洲及北美发现的3种毒素是脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇和15-脱氧雪腐镰刀菌烯醇。由于它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响。根据DON的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激。当人摄入了被DON污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。由于中国传统饮食习惯中粮谷比例大大高于西方，使得呕吐毒素的危害更为突出。1998年，在国际癌症研究机构公布的评价报告中，呕吐毒素被列为3类致癌物。欧盟要求呕吐毒素要小于1.0mg/kg；中国饲料要求低于1ppm。
《GB 5009.111-2023食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》第二法免疫亲和层析净化高效液相色谱法，试样中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇用水提取，经免疫亲和柱净化后，用高效液相色谱-紫外检测器测定，外标法定量。
曼哈格参考《GB 5009.111-2023食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》第二法，重现了国标食品中呕吐毒素的检测方法，采用小麦粉中呕吐毒素质控样BQC1010147223，乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（BePure-21712XA-1.2mL）标准溶液，脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱净化样品，C18色谱柱分离，高效液相色谱仪紫外检测器检测，外标法定量。
一、标准物质
单标：乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇，100μg/mL
货号：BePure-21712XA-1.2mL
二、前处理
萃取柱:脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱，
货号：66011
质控样品：小麦粉中呕吐毒素
货号：BQC1010147223
1标准溶液配制
标准储备溶液(100μg/mL)：BePure-21712XA-1.2mL，乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇，100μg/mL。
混合标准工作溶液(10μg/mL):准确吸取 100μg/mL DON标准储备液1.0 mL于同一10 mL容量瓶中 ,加乙腈定容至刻度。
标准系列工作溶液:准确移取适量脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备溶液用初始流动相稀释,配制成100 ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、5000ng/mL 的标准系列工作液，4℃保存，有效期7d。
2提取
称取5g试样(准确至0.1g)于50 mL离心管中，加入1g聚乙二醇，加水20mL，涡旋混匀，置于超声波中超声20min，以玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清（或在6000 r/min下离心10 min.）。收集滤液于干净的容器中。10000r/min离心5min。
3净化
免疫亲和柱净化：
事先将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温。待免疫亲和柱内原有液体流尽后，将上述样液移至玻璃注射器中，准确移取上述滤液2mL，注入玻璃注射器中。将空气压力泵与玻璃注射器相连接，调节下滴速度，控制样液以每秒1滴的速度通过免疫亲和柱，直至空气进入亲和柱中。用5mLPBS缓冲盐溶液和5mL水先后淋洗免疫亲和柱，流速约为每秒1滴-2滴，直至空气进入亲和柱中，弃去全部流出液，抽干小柱。
洗脱：
准确加入2mL甲醇洗脱亲和柱，控制每秒1滴的下滴速度，收集全部洗脱液至试管中。在50℃下用氮气缓缓地将洗脱液吹至近干，加人1.0 mL初始流动相，涡旋30 s溶解残留物，0.45 μm滤膜过滤，收集滤液于进样瓶中以备进样。
三、仪器检测方法：
液相色谱柱：C18柱（250mm 4.6mm 5μm)
流动相：甲醇+水（20+80）
流速：1mL/min
柱温：35℃
进样量：20μL
检测波长：218nm
四、检测结果
检测项目
样品编号
称样量m（g）
原始数据ρ（μg/mL）
检测结果X（mg/kg）
平均值
1
2
1
2
1
2
（ mg/kg）
脱氧雪腐镰刀菌烯醇
BQC1010147223
5.00
5.00
1.1543
1.0585
2.31
2.12
2.26
加标回收
添加物质
添加浓度（mg/kg）
仪器读数ρ（μg/mL）
测定值（μg/kg）
回收率(%)
脱氧雪腐镰刀菌烯醇
2
1.0065
4.03
90
柱回收率验证（GB 5009.111-2016附录A）
仪器读数（μg/mL）
回收率(%)
柱回收率验证-1
1.087
91
柱回收率验证-2
1.105
92
柱回收率验证-3
1.157
96
五、谱图
2mg/L呕吐毒素标准曲线点 液相色谱图
小麦粉中呕吐毒素 液相色谱图
小麦粉中呕吐毒素加标样品 液相色谱图
呕吐毒素标准曲线
相关产品订购信息
货号
产品描述
规格
BePure-21712XA-1.2mL
标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON),100μg/mL
1.2mL
BePure-21712XA
标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON),100μg/mL
1mL
BePure-21712-5mg
标准物质/脱氧雪腐镰刀菌烯醇
5mg
BePure-21712YA
标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON)，1000μg/mL
1mL
BePure-21712ZA-1.2mL
标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON）,500μg/mL
1.2mL
BePure-21712XA-5mL
标准物质/乙腈中脱氧雪腐镰刀菌烯醇/(DON),100μg/mL
5mL
BQC1010147223
基体/小麦粉中呕吐毒素
20g
66011
实验耗材/呕吐毒素亲和柱/柱容量1500ng，3ml
25支/盒
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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。
2. 净化：提取液过免疫亲和柱，用水淋洗后洗脱；
3. 浓缩：洗脱液氮吹至近干，用初始流动相复溶；
4. 仪器分析：HPLC-MS/MS检测，外标法定量。
2. 免疫亲和柱需验证批间差异，避免交叉污染；
3. 标准物质需避光保存于-20℃，避免反复冻融。
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