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标准物质/L-亮氨酸

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国家标准解读: 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定
标准名称及标准号 GB 5009.124-2016《食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定》
适用范围 适用于食品中包括L-亮氨酸在内的氨基酸含量检测,覆盖乳制品、婴幼儿配方食品、谷物制品等基质。
核心检测方法 采用高效液相色谱法(HPLC)结合柱前或柱后衍生化技术,以邻苯二甲醛(OPA)为衍生试剂,实现氨基酸的分离与定量。
检出限与定量限 L-亮氨酸的检出限为0.1 mg/kg,定量限为0.3 mg/kg(以干基计)。
质控样品要求 需包含空白样品、平行样及加标回收样;加标浓度应为待测样品浓度的50%-150%,回收率应控制在85%-115%。
关键实验步骤 1. 样品前处理:酸水解或酶解提取氨基酸;
2. 衍生化反应:OPA与氨基酸在碱性条件下生成荧光衍生物;
3. 色谱分析:C18色谱柱分离,荧光检测器检测(激发波长340 nm,发射波长450 nm)。
特别说明 酸水解可能导致色氨酸破坏,若需检测色氨酸需采用碱水解;L-亮氨酸需与异亮氨酸等结构类似物分离,色谱条件需严格优化。
行业标准解读:YY/T 0189-2022 医药工业用氨基酸测定法
标准名称及标准号 YY/T 0189-2022《医药工业用氨基酸测定法》
适用范围 专用于医药原料药、中间体及制剂中L-亮氨酸等氨基酸的纯度与含量测定。
核心检测方法 离子交换色谱法(IEC)结合茚三酮柱后衍生,通过氨基酸分析仪实现高精度定量。
检出限与定量限 L-亮氨酸的最低检测浓度为0.05 μg/mL,定量限为0.15 μg/mL。
质控样品要求 需使用标准氨基酸混合物进行系统适用性测试,保留时间偏差不得超过±2%,峰面积RSD≤1.5%。
关键实验步骤 1. 样品溶解:超纯水或缓冲液溶解并过滤;
2. 色谱条件:钠型阳离子交换柱,梯度洗脱程序;
3. 衍生检测:茚三酮试剂在130℃反应,570 nm/440 nm双波长检测。
特别说明 需定期更换离子交换柱填充树脂,缓冲液pH值波动需控制在±0.05范围内。
国家标准解读:GB/T 5009.82-2016 食品中维生素和氨基酸的测定
标准名称及标准号 GB/T 5009.82-2016《食品中维生素和氨基酸的测定》
适用范围 适用于强化食品、营养补充剂中L-亮氨酸的检测,包括片剂、胶囊、液体剂型。
核心检测方法 紫外分光光度法:基于L-亮氨酸在570 nm处与茚三酮的显色反应进行定量,适用于快速筛查。
检出限与定量限 分光光度法检出限为1.0 mg/100g,定量限为3.0 mg/100g。
质控样品要求 每批次至少测定3个浓度水平的质控样,显色反应时间需精确控制在10±0.5分钟。
关键实验步骤 1. 样品粉碎与均质;
2. 水浴显色:茚三酮试剂在沸水浴中反应;
3. 冷却后于570 nm测定吸光度,标准曲线法定量。
特别说明 该方法易受脯氨酸、羟脯氨酸干扰,复杂基质建议结合色谱法验证。

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